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Calculadora de concentração de DNA (absorbância A260)
Determina a concentração de DNA pela absorbância UV a 260 nm: concentração (µg/mL) = A260 × fator de diluição × constante ÷ trajeto óptico (cm). Constantes: DNA de fita dupla 1 OD = 50 µg/mL, fita simples 1 OD = 33 µg/mL (RNA 40 — veja a ferramenta de RNA). 1 µg/mL = 1 ng/µL; informe o volume de eluição para obter o rendimento total em µg. Inclui a janela linear 0.1–1.5: abaixo de 0.1 o ruído domina, acima de 1.5 o detector pode saturar. Pureza avalie por OD260/280. Fontes: Marmur & Doty 1961/1962, Sambrook & Russell, Thermo Fisher NanoDrop. Apenas para educação e planejamento experimental.
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Exemplos
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Guia de uso da ferramenta
Veja quando usar esta ferramenta, o que ela suporta e como os usuários a aplicam.
Fatos principais
Categoria
Education
Tipos de entrada
number, select
Tipo de saída
json
Cobertura de exemplos
4
API pronta
Sim
Visão geral
A Calculadora de concentração de DNA usa a absorbância A260, o tipo de DNA, o fator de diluição e o trajeto óptico para estimar a concentração em µg/mL e ng/µL. Com o volume de eluição, também calcula o rendimento total em µg e indica se a leitura está na faixa linear de 0,1 a 1,5.
Quando usar
Para estimar a concentração de DNA de fita dupla ou fita simples a partir de uma leitura A260.
Para corrigir o resultado de uma amostra diluída ou medida com trajeto óptico diferente de 1 cm.
Para calcular o rendimento total de DNA quando o volume de eluição é conhecido.
Como funciona
1Informe a absorbância medida a 260 nm, após o branco com o tampão de eluição.
2Selecione DNA de fita dupla, que usa a constante 50 µg/mL por OD, ou fita simples, que usa 33 µg/mL por OD.
3Insira o fator de diluição e o trajeto óptico; a ferramenta aplica concentração = A260 × fator de diluição × constante ÷ trajeto óptico.
4Opcionalmente, informe o volume de eluição para obter o rendimento total e verifique a indicação da faixa linear de 0,1 a 1,5.
Casos de uso
Quantificar DNA de plasmídeo após uma miniprep.
Estimar a concentração de preparações de DNA de fita simples.
Calcular a quantidade total recuperada em um volume de eluição.
Exemplos
1. Miniprep de plasmídeo diluída 1:10
Pesquisador de biologia molecular
Contexto
Uma amostra de plasmídeo foi diluída 1:10 e apresentou A260 de 0,25 em uma cubeta com trajeto óptico de 1 cm. O volume final de eluição foi 100 µL.
Problema
Determinar a concentração de DNA de fita dupla e o rendimento total da eluição.
Como usar
Informe A260 = 0,25, selecione DNA de fita dupla, use fator de diluição 10, trajeto óptico de 1 cm e volume de amostra de 100 µL.
A260: 0,25; tipo: DNA de fita dupla; diluição: 10; trajeto óptico: 1 cm; volume: 100 µL.
Resultado
A concentração calculada é 125 µg/mL, equivalente a 125 ng/µL. O rendimento total é 12,5 µg, com leitura dentro da faixa linear.
2. Leitura elevada de DNA de fita simples
Estudante em aula prática
Contexto
Uma preparação não diluída de DNA de fita simples apresentou A260 de 1,8 em uma cubeta de 1 cm. Não é necessário calcular o rendimento total.
Problema
Calcular a concentração usando a constante de fita simples e identificar se a leitura é adequada.
Como usar
Perguntas frequentes
Quais tipos de DNA a calculadora aceita?
Ela calcula DNA de fita dupla usando 50 µg/mL por OD e DNA de fita simples usando 33 µg/mL por OD.
Qual é a relação entre µg/mL e ng/µL?
Os valores são numericamente iguais: 1 µg/mL corresponde a 1 ng/µL.
Como informar o fator de diluição?
Use 1 para uma amostra não diluída. Para uma diluição de 1:10, informe 10.
O que significa uma A260 acima de 1,5?
A leitura está acima da faixa linear indicada e o detector pode saturar; dilua a amostra e faça uma nova medição.
A calculadora avalia a pureza do DNA?
Não. A pureza deve ser avaliada separadamente pela razão OD260/280.