Calculadora de pureza de ácidos nucleicos (OD260/280) | Ferramenta online grátis | Elysia Tools
Elysia Tools
Navegação
Education
Calculadora de pureza de ácidos nucleicos (OD260/280)
Avalia a pureza de ácidos nucleicos pela razão OD260/280: as bases absorvem no máximo a 260 nm e os aminoácidos aromáticos (e o fenol) perto de 280 nm, então A260/A280 diagnostica arraste de proteína/fenol. Valores esperados: DNA puro ≈ 1.8 (janela 1.7–2.0), RNA puro ≈ 2.0 (janela 1.8–2.2); DNA < 1.7 ou RNA < 1.8 indica contaminação por proteína/fenol/guanidina, DNA > 2.0 sugere contaminação com RNA, RNA > 2.2 aponta artefato de medição (baixa força iônica). Campo A230 opcional para a razão secundária A260/A230 (puro 2.0–2.2; abaixo disso guanidina/fenol/carboidratos/sais). Com leituras < ~0.05 a razão não é confiável. Fontes: Manchester 1995, Sambrook & Russell, Thermo Fisher T042. Apenas educação e planejamento.
Execução
Executar esta ferramenta
Preencha o formulário, execute a ferramenta e veja o resultado no mesmo lugar.
Exemplos
Exemplos compatíveis com esta ferramenta
Relacionado
Continue com ferramentas e temas relacionados
Resultado
Pronto para executar
Depois de executar, arquivos, texto, dados estruturados ou saída em streaming aparecerão aqui.
Guia de uso da ferramenta
Veja quando usar esta ferramenta, o que ela suporta e como os usuários a aplicam.
Fatos principais
Categoria
Education
Tipos de entrada
select, number
Tipo de saída
json
Cobertura de exemplos
4
API pronta
Sim
Visão geral
A Calculadora de pureza de ácidos nucleicos (OD260/280) calcula a razão A260/A280 para avaliar DNA ou RNA e identifica possíveis sinais de contaminação por proteínas, fenol ou outros resíduos. Opcionalmente, também calcula A260/A230 para verificar guanidina, fenol, carboidratos e sais.
Quando usar
Verificar se um preparo de DNA está próximo da razão esperada de 1,8.
Avaliar a pureza de RNA, cujo valor esperado de A260/A280 é aproximadamente 2,0.
Investigar contaminação adicional usando a razão A260/A230 antes de etapas posteriores.
Como funciona
1Selecione o tipo de ácido nucleico: DNA ou RNA.
2Informe as absorbâncias A260 e A280 medidas na mesma amostra diluída.
3Opcionalmente, informe A230 para calcular também A260/A230.
4A ferramenta divide A260 por A280, compara o resultado com a janela esperada e apresenta a interpretação em JSON; leituras abaixo de aproximadamente 0,05 tornam a razão pouco confiável.
Casos de uso
Controle rápido da pureza de DNA antes de digestão enzimática ou sequenciamento.
Triagem de RNA antes de RT-qPCR, especialmente quando há suspeita de arraste de fenol ou reagentes de extração.
Comparação das razões A260/A280 e A260/A230 para orientar a repurificação de amostras.
Exemplos
1. Preparo de DNA com razão próxima do ideal
Pesquisador de biologia molecular
Contexto
Um preparo de plasmídeo apresentou A260 = 0,45 e A280 = 0,25 no mesmo material diluído.
Problema
Confirmar se a amostra está dentro da faixa esperada para DNA e verificar possíveis resíduos adicionais.
Como usar
Selecione DNA, informe A260 como 0,45 e A280 como 0,25; depois informe A230 como 0,20.
A razão A260/A280 é 1,80, dentro da janela de 1,7 a 2,0 para DNA. A razão A260/A230 é 2,25, sem indicação de arraste orgânico ou de sais pela verificação secundária.
2. RNA com possível contaminação por fenol ou guanidina
Técnico de laboratório
Contexto
Uma preparação de RNA obtida com reagente de extração apresentou A260 = 0,60, A280 = 0,36 e A230 = 0,90.
Problema
Avaliar se a amostra pode seguir para RT-qPCR ou se precisa de repurificação.
Como usar
Selecione RNA e informe A260 como 0,60, A280 como 0,36 e A230 como 0,90.
Perguntas frequentes
Qual é a razão A260/A280 esperada para DNA puro?
Aproximadamente 1,8, com uma janela geralmente aceitável de 1,7 a 2,0.
Qual é a razão A260/A280 esperada para RNA puro?
Aproximadamente 2,0, com uma janela esperada de 1,8 a 2,2.
O que significa uma razão baixa?
Pode indicar contaminação por proteínas, fenol ou guanidina, dependendo do tipo de amostra.
Para que serve o campo A230?
Ele permite calcular A260/A230, uma verificação secundária de resíduos como guanidina, fenol, carboidratos e sais.
A calculadora substitui a análise laboratorial?
Não. Ela interpreta as absorbâncias informadas para fins educacionais e de planejamento, e não substitui a avaliação experimental.
A razão A260/A280 é 1,6667, abaixo da janela esperada de 1,8 a 2,2 para RNA, sugerindo contaminação por proteína ou fenol. A razão A260/A230 é 0,6667, compatível com possível arraste de guanidina, fenol ou sais.