Calculateur de concentration d'ADN (absorbance A260)

Calculateur de concentration d'ADN (absorbance A260) | Outil en ligne gratuit | Elysia Tools

Guide d'utilisation de l'outil

Découvrez quand utiliser cet outil, ce qu'il prend en charge et comment les utilisateurs l'appliquent.

Points clés

Catégorie: Education
Types d’entrée: number, select
Type de sortie: json
Exemples associés: 4
API disponible: Oui

Aperçu

Ce calculateur estime la concentration d’ADN à partir de l’absorbance A260, du facteur de dilution, du type d’ADN et de la longueur du trajet optique. Il fournit la concentration en µg/mL et ng/µL, ainsi que le rendement total si le volume d’élution est indiqué.

Quand l’utiliser

Convertir une mesure A260 en concentration d’ADN double brin ou simple brin.
Estimer le rendement total d’une extraction à partir de la concentration et du volume d’élution.
Vérifier si une absorbance se situe dans la fenêtre linéaire indicative de 0,1 à 1,5.

Fonctionnement

1Saisissez l’absorbance mesurée à 260 nm, après correction avec le blanc adapté.
2Sélectionnez le type d’ADN : double brin avec une constante de 50 µg/mL par OD, ou simple brin avec 33 µg/mL par OD.
3Indiquez le facteur de dilution et la longueur du trajet optique en centimètres.
4Ajoutez éventuellement le volume d’élution pour obtenir le rendement total en microgrammes.

Cas d’usage

Quantifier l’ADN issu d’une minipréparation de plasmide.
Comparer le rendement total de plusieurs extractions après élution.
Préparer une nouvelle mesure lorsque l’absorbance est trop faible ou trop élevée pour la fenêtre linéaire.

Exemples

1. Minipréparation de plasmide avec ADN double brin

Technicienne de laboratoire

Contexte

Une préparation de plasmide est diluée au 1:10 avant une mesure en cuve standard de 1 cm.

Problème

Convertir une absorbance A260 de 0,25 en concentration et calculer le rendement dans 100 µL d’élution.

Utilisation

Saisissez A260 = 0,25, sélectionnez l’ADN double brin, puis indiquez un facteur de dilution de 10, une longueur de trajet de 1 cm et un volume de 100 µL.

ADN double brin ; facteur de dilution : 10 ; trajet optique : 1 cm ; volume : 100 µL ; décimales : 2.

Résultat

La concentration obtenue est de 125 µg/mL, soit 125 ng/µL. Le rendement total est de 12,5 µg et la mesure se situe dans la plage linéaire.

2. Lecture trop élevée pour un ADN simple brin

Étudiant en biologie moléculaire

Contexte

Une préparation d’ADN simple brin non diluée donne une absorbance A260 de 1,8 dans une cuve de 1 cm.

Problème

Estimer la concentration tout en vérifiant la qualité de la mesure.

Utilisation

FAQ

Quelle formule le calculateur utilise-t-il ?

La formule est : concentration = A260 × facteur de dilution × constante ÷ longueur du trajet optique.

Quelle constante utiliser pour l’ADN double brin ?

Pour l’ADN double brin, la constante utilisée est de 50 µg/mL par unité d’absorbance.

Quelle constante utiliser pour l’ADN simple brin ?

Pour l’ADN simple brin, la constante utilisée est de 33 µg/mL par unité d’absorbance.

Que signifie une absorbance A260 supérieure à 1,5 ?

La mesure est au-dessus de la plage linéaire indicative et le détecteur peut saturer. Diluez l’échantillon et mesurez-le à nouveau.

Le calculateur évalue-t-il la pureté de l’ADN ?

Non. La pureté s’évalue notamment avec le rapport OD260/280 ; ce calculateur estime uniquement la concentration et, si demandé, le rendement total.

ADN simple brin ; facteur de dilution : 1 ; trajet optique : 1 cm ; volume : 0 µL ; décimales : 2.

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1. Minipréparation de plasmide avec ADN double brin

2. Lecture trop élevée pour un ADN simple brin

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