DNA-Konzentrationsrechner (A260-Absorption)

DNA-Konzentrationsrechner (A260-Absorption) | Kostenloses Online-Tool | Elysia Tools

Leitfaden zur Tool-Nutzung

Erfahren Sie, wann dieses Tool passt, was es unterstützt und wie Nutzer es anwenden.

Wichtige Fakten

Kategorie: Education
Eingabetypen: number, select
Ausgabetyp: json
Sample-Abdeckung: 4
API bereit: Ja

Überblick

Der DNA-Konzentrationsrechner bestimmt die DNA-Konzentration aus der A260-Absorption, dem DNA-Typ, dem Verdünnungsfaktor und der Schichtdicke. Er gibt die Werte in µg/mL und ng/µL aus und berechnet optional die Gesamtausbeute aus dem Elutionsvolumen.

Wann verwenden

Wenn die DNA-Konzentration einer verdünnten Probe aus einem A260-Messwert berechnet werden soll.
Wenn dsDNA und ssDNA mit der passenden Umrechnungskonstante ausgewertet werden sollen.
Wenn zusätzlich zur Konzentration die gesamte DNA-Menge eines Eluats bestimmt werden soll.

So funktioniert es

1Geben Sie die A260-Absorption der gegen den Elutionspuffer blankierten Probe ein.
2Wählen Sie zwischen doppelsträngiger DNA mit 50 µg/mL pro OD und einzelsträngiger DNA mit 33 µg/mL pro OD.
3Tragen Sie Verdünnungsfaktor und Schichtdicke ein. Das Tool berechnet nach der Formel A260 × Verdünnungsfaktor × Konstante ÷ Schichtdicke.
4Optional können Sie das Elutionsvolumen eingeben, um die Gesamtausbeute in µg zu erhalten. Zusätzlich wird der Messwert im linearen Bereich von 0,1 bis 1,5 eingeordnet.

Anwendungsfälle

Konzentrationsbestimmung von DNA-Eluaten nach einer Plasmid-Miniprep.
Vergleich der Ausbeute von dsDNA- und ssDNA-Proben anhand von A260-Messungen.
Versuchsplanung mit Konzentration, ng/µL und optionaler Gesamtmenge eines Eluats.

Beispiele

1. Plasmid-Miniprep mit verdünnter dsDNA

Laborpraktikant

Hintergrund

Eine 1:10 verdünnte Plasmidprobe zeigt in einer Standardküvette mit 1 cm Schichtdicke eine A260-Absorption von 0,25. Das Elutionsvolumen beträgt 100 µL.

Aufgabe

Die DNA-Konzentration und die Gesamtausbeute sollen aus dem Messwert berechnet werden.

Verwendung

A260 = 0,25, DNA-Typ = doppelsträngige DNA, Verdünnungsfaktor = 10, Schichtdicke = 1 cm und Probenvolumen = 100 µL eingeben.

A260: 0,25; dsDNA: 50 µg/mL pro OD; Verdünnungsfaktor: 10; Schichtdicke: 1 cm; Elutionsvolumen: 100 µL

Ergebnis

Das Ergebnis beträgt 125 µg/mL beziehungsweise 125 ng/µL. Das 100-µL-Eluat enthält insgesamt 12,5 µg DNA; die Messung liegt im linearen Bereich.

2. ssDNA-Messung oberhalb des linearen Bereichs

Molekularbiologe

Hintergrund

Eine unverdünnte einzelsträngige DNA-Probe wird mit A260 = 1,8 in einer Küvette mit 1 cm Schichtdicke gemessen.

Aufgabe

Die Konzentration soll berechnet und die Eignung des Messwerts beurteilt werden.

Verwendung

FAQ

Welche DNA-Typen unterstützt der Rechner?

Sie können zwischen doppelsträngiger DNA und einzelsträngiger DNA wählen.

Welche Konstanten verwendet das Tool?

Für dsDNA verwendet es 50 µg/mL pro OD, für ssDNA 33 µg/mL pro OD.

Was bedeutet der Verdünnungsfaktor?

Er beschreibt die Gesamtverdünnung vor der Messung. Bei unverdünnter DNA beträgt er 1.

Wann wird die Gesamtausbeute berechnet?

Wenn Sie ein Elutionsvolumen in µL eingeben. Bei 0 wird die Berechnung der Gesamtausbeute übersprungen.

Was bedeutet ein A260-Wert außerhalb von 0,1 bis 1,5?

Unter 0,1 kann das Rauschen dominieren, über 1,5 kann der Detektor sättigen. Hohe Werte sollten verdünnt und erneut gemessen werden.

A260: 1,8; ssDNA: 33 µg/mL pro OD; Verdünnungsfaktor: 1; Schichtdicke: 1 cm; Probenvolumen: 0 µL

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Wann verwenden

So funktioniert es

Anwendungsfälle

Beispiele

1. Plasmid-Miniprep mit verdünnter dsDNA

2. ssDNA-Messung oberhalb des linearen Bereichs

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