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Avalia a contaminação por sais e solventes orgânicos pela razão OD260/230 — o controle que enxerga o que o 260/280 não vê: ácido nucleico puro dá 2.0–2.2, e valores abaixo de 2.0 sinalizam arraste de guanidínio (TRIzol/kits de coluna), fenol, carboidratos, EDTA, sais altos ou β-mercaptoetanol; 2.2–2.3 costuma ser efeito aceitável do tampão; acima de 2.3 aponta artefato de água/tampão — remedir. Campo A280 opcional para o cruzamento OD260/280 (DNA ~1.8, RNA ~2.0): uma série de leituras cobre as duas dimensões de pureza. Com leituras < ~0.05 a razão não é confiável. Fontes: Thermo Fisher T042, Sambrook & Russell, Manchester 1995. Apenas educação.
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Guia de uso da ferramenta
A Calculadora de pureza OD260/230 calcula a razão entre as absorbâncias a 260 e 230 nm para avaliar possíveis resíduos de guanidínio, fenol, sais, EDTA ou outros contaminantes em amostras de DNA e RNA. Você também pode informar A280 para obter uma verificação opcional da razão OD260/280.
Contexto
Um plasmídeo purificado em coluna apresenta A260 = 0,5, A230 = 0,25 e A280 = 0,278.
Problema
Confirmar se há indicação de arraste de sais ou guanidínio antes de uma etapa de transfecção.
Como usar
Selecione DNA e informe A260 = 0,5, A230 = 0,25 e A280 = 0,278.
Casas decimais: 2.Resultado
A razão OD260/230 é 2,00, dentro da faixa de 2,0–2,2, e a OD260/280 é 1,80, compatível com DNA puro.
Contexto
Uma amostra de RNA extraída com TRIzol apresenta A260 = 0,60, A230 = 1,20 e A280 = 0,36.
Problema
Avaliar se a amostra precisa de repurificação antes de RT-qPCR.
Como usar
Selecione RNA e informe A260 = 0,60, A230 = 1,20 e A280 = 0,36.
Geralmente indica ácido nucleico puro, sem evidência de arraste relevante de sais ou solventes orgânicos.
Pode indicar contaminação por guanidínio, fenol, carboidratos, EDTA, sais altos ou β-mercaptoetanol.
Não. A280 é opcional e serve para calcular a verificação adicional OD260/280.
Aproximadamente 1,8 para DNA puro e 2,0 para RNA puro.
Não. Ela interpreta as leituras fornecidas para fins educacionais e de planejamento experimental.
Casas decimais: 3.Resultado
A razão OD260/230 é 0,500, muito abaixo de 2,0, sugerindo arraste de guanidínio, fenol ou sais. A OD260/280 é 1,667, abaixo do valor esperado para RNA.