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Calculadora de concentración de ADN (absorbancia A260)
Determina la concentración de ADN por absorbancia UV a 260 nm: concentración (µg/mL) = A260 × factor de dilución × constante ÷ camino óptico (cm). Constantes: ADN doble cadena 1 OD = 50 µg/mL, ADN monocadena 1 OD = 33 µg/mL (ARN 40, ver herramienta de ARN). 1 µg/mL = 1 ng/µL; introduzca el volumen de elución para obtener el rendimiento total en µg. Incluye la ventana lineal 0.1–1.5: por debajo de 0.1 domina el ruido, por encima de 1.5 el detector puede saturarse. La pureza se evalúa con OD260/280. Fuentes: Marmur & Doty 1961/1962, Sambrook & Russell, Thermo Fisher NanoDrop. Solo para educación y planificación experimental.
Ejecución
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Guía de uso de la herramienta
Conoce cuándo usar esta herramienta, qué admite y cómo la aplican los usuarios.
Datos clave
Categoría
Education
Tipos de entrada
number, select
Tipo de salida
json
Cobertura de ejemplos
4
API disponible
Sí
Resumen
Calcula la concentración de ADN a partir de la absorbancia A260, el tipo de ADN, el factor de dilución y la longitud del camino óptico. Obtén el resultado en µg/mL y ng/µL, y calcula el rendimiento total en µg si introduces el volumen de elución.
Cuándo usarlo
Para estimar la concentración de ADN de doble cadena o cadena simple mediante una lectura A260.
Para corregir una medición realizada después de diluir la muestra o con una cubeta de longitud distinta.
Para calcular el rendimiento total de una extracción a partir de la concentración y el volumen de elución.
Cómo funciona
1Introduce la absorbancia medida a 260 nm, preferiblemente con la muestra diluida y el blanco aplicado.
2Selecciona ADN de doble cadena, con una constante de 50 µg/mL por OD, o ADN de cadena simple, con 33 µg/mL por OD.
3Indica el factor de dilución y la longitud del camino óptico en centímetros.
4La herramienta calcula la concentración, la convierte a ng/µL y estima el rendimiento total si se proporciona el volumen de muestra.
Casos de uso
Cuantificación de ADN plasmídico después de una miniprep.
Estimación de la concentración de preparaciones de ADN monocadena.
Cálculo del rendimiento total de ADN recuperado en un volumen de elución conocido.
Ejemplos
1. Miniprep de plásmido diluida 1:10
Investigador de biología molecular
Contexto
Una muestra de ADN plasmídico de doble cadena se mide en una cubeta estándar de 1 cm después de una dilución 1:10.
Problema
La lectura A260 es 0.25 y se necesita conocer la concentración y el rendimiento de una elución de 100 µL.
Cómo usarlo
Introduce A260 = 0.25, selecciona ADN de doble cadena, usa un factor de dilución de 10, una longitud de camino de 1 cm y un volumen de 100 µL.
La concentración calculada es 125 µg/mL, equivalente a 125 ng/µL, con un rendimiento total de 12.5 µg.
2. Preparación de ADN monocadena por encima del rango lineal
Estudiante de laboratorio
Contexto
Una preparación de ADN de cadena simple se mide sin diluir en una cubeta de 1 cm.
Problema
La lectura A260 es 1.8, por encima del límite superior aproximado del rango lineal.
Cómo usarlo
Introduce A260 = 1.8, selecciona ADN de cadena simple, usa un factor de dilución de 1 y una longitud de camino de 1 cm. No introduzcas volumen de muestra.
Preguntas frecuentes
¿Qué fórmula utiliza la calculadora?
Concentración (µg/mL) = A260 × factor de dilución × constante ÷ longitud del camino óptico.
¿Qué constante corresponde al ADN de doble cadena?
La calculadora utiliza 50 µg/mL por OD para el ADN de doble cadena.
¿Qué constante corresponde al ADN de cadena simple?
La calculadora utiliza 33 µg/mL por OD para el ADN de cadena simple.
¿Cuándo debo introducir el volumen de muestra?
Introduce el volumen total de elución en µL para calcular el rendimiento total en µg. Usa 0 si no necesitas ese cálculo.
¿Qué significa una A260 fuera de 0.1–1.5?
Por debajo de 0.1 puede dominar el ruido y por encima de 1.5 el detector puede saturarse; conviene diluir o revisar la medición.