Was bedeutet das OD260/230-Verhältnis?

Es beschreibt das Verhältnis der Absorption bei 260 nm zu der bei 230 nm und ergänzt die Reinheitsprüfung über OD260/280.

Welcher OD260/230-Wert gilt als gut?

Für reine Nukleinsäure liegt der Wert typischerweise bei 2,0–2,2.

Was bedeutet ein OD260/230-Wert unter 2,0?

Ein niedriger Wert kann auf Guanidinium-, Phenol-, Salz-, EDTA-, Kohlenhydrat- oder β-Mercaptoethanol-Rückstände hinweisen.

Kann ich das OD260/280-Verhältnis ebenfalls berechnen?

Ja. Geben Sie dafür optional A280 an. Erwartungswerte liegen ungefähr bei 1,8 für DNA und 2,0 für RNA.

Wann ist das Verhältnis unzuverlässig?

Bei Absorptionsmesswerten unter etwa 0,05 ist das berechnete Verhältnis unzuverlässig.

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OD260/230-Reinheitsrechner (Salz-/Lösungsmittelkontamination)

Bewertet Salz- und organische Lösungsmittelkontamination über das OD260/230-Verhältnis — die Kontrolle, die sieht, was 260/280 verpasst: reine Nukleinsäure liefert 2.0–2.2, Werte darunter signalisieren Guanidinium-Verschleppung (TRIzol/Säulen-Kits), Phenol, Kohlenhydrate, EDTA, hohe Salze oder β-Mercaptoethanol; 2.2–2.3 ist meist ein akzeptabler Puffereffekt; über 2.3 deutet auf ein Wasser-/Pufferartefakt hin — nachmessen. Optionales A280 für den OD260/280-Kreuzcheck (DNA ~1.8, RNA ~2.0): eine Messreihe deckt beide Reinheitsdimensionen ab. Unter ~0.05 Messwert ist das Verhältnis unzuverlässig. Quellen: Thermo Fisher T042, Sambrook & Russell, Manchester 1995. Nur für Ausbildung.

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2. TRIzol-RNA mit möglicher Guanidinium- und Phenolkontamination

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