Bestimmt die RNA-Konzentration über die UV-Absorption bei 260 nm: Konzentration (µg/mL) = A260 × Verdünnungsfaktor × 40 ÷ Schichtdicke (cm). Die RNA-Konstante ist 1 OD = 40 µg/mL — zwischen doppelsträngiger DNA (50) und einzelsträngiger DNA (33); ein häufiger Fehler ist die dsDNA-Konstante 50 beizubehalten, was die RNA-Ausbeute um 25% überhöht. 1 µg/mL = 1 ng/µL; mit Elutionsvolumen ergibt sich die Gesamtausbeute. Enthält das lineare Fenster 0.1–1.5; reine RNA liefert OD260/280 ≈ 2.0 (DNA ~1.8) — Reinheit mit dem Ratio-Tool prüfen. RNase-frei und auf Eis arbeiten. Quellen: Marmur & Doty, Sambrook & Russell, Manchester 1995, Thermo Fisher. Nur für Ausbildung und Versuchsplanung.
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Wichtige Fakten
Kategorie
Education
Eingabetypen
number
Ausgabetyp
json
Sample-Abdeckung
4
API bereit
Ja
Überblick
Der RNA-Konzentrationsrechner bestimmt aus A260-Absorption, Verdünnungsfaktor und Schichtdicke die RNA-Konzentration mit der Konstante 1 OD = 40 µg/mL. Zusätzlich gibt er den Wert in ng/µL, auf Wunsch die Gesamtausbeute und eine Einordnung des linearen Messbereichs aus.
Wann verwenden
Wenn du die Konzentration einer RNA-Probe nach einer A260-Messung berechnen möchtest.
Wenn eine verdünnte Probe oder eine abweichende Schichtdicke berücksichtigt werden muss.
Wenn du aus Konzentration und Elutionsvolumen die gesamte RNA-Menge abschätzen möchtest.
So funktioniert es
1Gib die gemessene A260-Absorption der Probe ein.
2Trage den Verdünnungsfaktor und die Schichtdicke in Zentimetern ein.
3Das Tool berechnet die Konzentration mit A260 × Verdünnungsfaktor × 40 ÷ Schichtdicke.
4Optional wird aus dem Probenvolumen die Gesamtausbeute berechnet und A260 im linearen Bereich von etwa 0,1 bis 1,5 eingeordnet.
Anwendungsfälle
RNA-Extrakte nach der Messung am Spektrophotometer quantifizieren.
Verdünnte Proben auf die tatsächliche Konzentration zurückrechnen.
Die verfügbare RNA-Menge für die weitere Versuchsplanung abschätzen.
Beispiele
1. Total-RNA-Präparat mit 1:5-Verdünnung
Molekularbiologin
Hintergrund
Eine Total-RNA-Probe wurde im Verhältnis 1:5 verdünnt und in einer 1-cm-Küvette mit A260 = 0,4 gemessen. Das Elutionsvolumen beträgt 250 µL.
Aufgabe
Die tatsächliche RNA-Konzentration und die gesamte RNA-Menge sollen bestimmt werden.
Verwendung
A260 = 0,4, Verdünnungsfaktor = 5, Schichtdicke = 1 cm und Probenvolumen = 250 µL eingeben.
Gib den gesamten Verdünnungsfaktor ein. Für eine unverdünnte Probe ist der Wert 1.
Wie wird die Gesamtausbeute berechnet?
Gib das gesamte Elutionsvolumen in µL ein. Daraus berechnet das Tool die RNA-Menge in µg; bei 0 wird diese Berechnung übersprungen.
Was bedeutet eine A260 unter 0,1?
Die Messung liegt unter dem angegebenen linearen Bereich und kann dadurch weniger zuverlässig sein. Eine weniger verdünnte Nachmessung kann sinnvoll sein.