Calculateur du dosage BCA (courbe standard) | Outil en ligne gratuit | Elysia Tools
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Calculateur du dosage BCA (courbe standard)
Dose les protéines par la méthode BCA (acide bicinchoninique, 562 nm) avec courbe standard : collez les lignes « concentration(µg/mL), A562 » et les absorbances des essais ; l'outil ajuste par moindres carrés (pente, ordonnée, R²), inverse c = (A−b)/m puis applique la dilution (µg/mL et mg/mL). Les lectures hors plage sont signalées comme extrapolations ; sous le blanc, rejetées. Spécificités BCA : tolère ~5 % de détergent (mieux que Bradford pour les lysats) ; mais DTT/TCEP/β-mercaptoéthanol (>1 mM) et EDTA élevé réduisent/chélatent le Cu²⁺ et gonflent la lecture — éliminez-les d'abord ; plage utile ~20–2000 µg/mL (Micro BCA 0,5–20). Source : Smith 1985 Anal Biochem. Uniquement à but éducatif.
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Points clés
Catégorie
Education
Types d’entrée
textarea, number
Type de sortie
json
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4
API disponible
Oui
Aperçu
Ce calculateur de dosage BCA estime la concentration en protéines à partir d’une courbe standard et de lectures d’absorbance A562. Il ajuste une droite par moindres carrés, calcule la pente, l’ordonnée à l’origine et le R², puis applique le facteur de dilution pour fournir les résultats en µg/mL et en mg/mL.
Quand l’utiliser
Quantifier des protéines dans des échantillons mesurés à 562 nm avec une série de standards.
Calculer la concentration réelle d’un échantillon après une dilution connue.
Vérifier rapidement la qualité d’une courbe standard grâce à sa pente, son intercept et son R².
Fonctionnement
1Collez une concentration et une absorbance A562 par ligne dans le champ des standards, avec des séparateurs comme la virgule, le point-virgule, la tabulation ou l’espace.
2Saisissez une absorbance A562 par ligne pour chaque échantillon inconnu.
3L’outil ajuste la relation entre concentration et absorbance par moindres carrés, puis inverse c = (A − b) / m.
4Le résultat est corrigé avec le facteur de dilution et affiché en µg/mL et en mg/mL ; les valeurs hors plage sont signalées comme extrapolations.
Cas d’usage
Quantification de protéines dans des lysats contenant des détergents compatibles avec le BCA.
Calcul de concentrations d’échantillons avant une préparation ou une comparaison expérimentale.
Contrôle pédagogique d’une courbe standard BCA et de l’effet d’un facteur de dilution.
Exemples
1. Courbe standard linéaire pour deux lysats
Étudiant en biochimie
Contexte
Une série de standards comprise entre 0 et 2000 µg/mL présente une relation linéaire avec l’absorbance A562.
Problème
Obtenir la concentration de deux échantillons dont les lectures sont 0,735 et 1,640.
Utilisation
Saisissez les cinq lignes de standards, puis entrez les deux absorbances inconnues et un facteur de dilution de 1.
La droite obtenue est A562 = 0,001c avec R² = 1,00. Les concentrations calculées sont 735 µg/mL et 1640 µg/mL, soit 0,735 et 1,64 mg/mL.
2. Correction d’un échantillon dilué cinq fois
Technicienne de laboratoire
Contexte
Les standards incluent un blanc à 0,030 et suivent une relation A562 = 0,001c + 0,03.
Problème
Convertir une lecture de 0,530 mesurée sur un échantillon préalablement dilué cinq fois en concentration du stock.
Utilisation
Entrez les standards avec leur absorbance, saisissez 0,530 comme inconnue et indiquez un facteur de dilution de 5.
FAQ
Quelles données dois-je fournir ?
Une liste de standards au format concentration en µg/mL, A562, ainsi que les absorbances A562 des échantillons inconnus.
Le calculateur applique-t-il la dilution ?
Oui. Il multiplie la concentration mesurée dans le puits par le facteur de dilution indiqué ; 1 correspond à un échantillon non dilué.
Que signifient la pente, l’ordonnée et le R² ?
La pente et l’ordonnée définissent la droite ajustée A562 = m·c + b, tandis que le R² indique la qualité de l’ajustement linéaire.
Que se passe-t-il si une absorbance est hors de la courbe ?
Elle est calculée mais signalée comme une extrapolation. Il est préférable de diluer ou de concentrer l’échantillon pour rester dans la plage des standards.
Le calculateur remplace-t-il une validation expérimentale ?
Non. Il est fourni à des fins éducatives et ne remplace ni les contrôles expérimentaux ni l’évaluation des interférences.