Calculateur du dosage Bradford (courbe standard BSA) | Outil en ligne gratuit | Elysia Tools
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Calculateur du dosage Bradford (courbe standard BSA)
Dose les protéines par la méthode de Bradford (Coomassie G-250, 595 nm) avec courbe standard de BSA : collez les lignes « concentration(µg/mL), A595 » des standards et les absorbances des essais ; l'outil ajuste par moindres carrés (pente, ordonnée, R²), inverse c = (A−b)/m puis multiplie par le facteur de dilution, en renvoyant µg/mL et mg/mL. Les lectures hors plage de standards sont signalées comme extrapolations ; celles sous le blanc sont rejetées comme non quantifiables. Points clés : la réponse du colorant varie fortement selon la protéine (BSA ≈ le double de l'IgG) et les détergents élevés interfèrent ; standards et essais dans le même tampon. Source : Bradford 1976 Anal Biochem. Uniquement à but éducatif.
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Points clés
Catégorie
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Types d’entrée
textarea, number
Type de sortie
json
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4
API disponible
Oui
Aperçu
Ce calculateur du dosage Bradford estime la concentration en protéines à partir d’une courbe standard de BSA et de mesures d’absorbance A595. Il ajuste une régression linéaire, calcule les concentrations inconnues, applique le facteur de dilution et fournit les résultats en µg/mL et mg/mL.
Quand l’utiliser
Quantifier des échantillons protéiques à partir de lectures d’absorbance à 595 nm.
Convertir plusieurs mesures A595 en concentrations grâce à une courbe standard de BSA.
Vérifier rapidement la pente, l’ordonnée à l’origine et le R² d’un ajustement linéaire.
Fonctionnement
1Saisissez une ligne par standard au format concentration en µg/mL, puis A595, avec une virgule, un point-virgule, une tabulation ou un espace comme séparateur.
2Ajoutez une absorbance A595 par ligne pour les échantillons inconnus et indiquez le facteur de dilution appliqué.
3L’outil ajuste les standards par moindres carrés et obtient la pente, l’ordonnée à l’origine et le R².
4Il inverse l’équation c = (A − b) / m, applique la dilution et signale les extrapolations ou les valeurs sous le blanc comme non quantifiables.
Cas d’usage
Estimer la concentration de protéines dans des lysats ou des solutions préparées pour une expérience.
Analyser plusieurs puits de microplaque à partir d’une même courbe standard BSA.
Comparer rapidement des séries de mesures et contrôler la qualité de l’ajustement avec le R².
Exemples
1. Courbe BSA linéaire sans dilution
Étudiant en biochimie
Contexte
Une série de standards BSA donne les couples 0/0,00, 10/0,20, 20/0,40 et 40/0,80 en concentration µg/mL et A595.
Problème
Déterminer la concentration de deux échantillons mesurés à A595 0,50 et 0,25.
Utilisation
Saisissez les quatre lignes de standards dans le champ correspondant, puis entrez 0,50 et 0,25 comme absorbances inconnues.
Facteur de dilution : 1 ; décimales : 2.
Résultat
La droite obtenue est A = 0,02c, avec R² = 1,00. Les concentrations sont de 25,00 et 12,50 µg/mL, soit 0,025 et 0,0125 mg/mL dans les échantillons.
2. Prise en compte d’un blanc et d’une dilution ×10
Technicienne de laboratoire
Contexte
Les standards 0, 25, 50 et 100 µg/mL présentent respectivement des A595 de 0,05, 0,30, 0,55 et 1,05. Le lysat a été dilué dix fois avant le dosage.
Problème
Convertir une lecture A595 de 0,35 en concentration dans le lysat initial.
Utilisation
Collez les quatre paires de standards, saisissez 0,35 dans les absorbances inconnues et indiquez un facteur de dilution de 10.
FAQ
Quelles données faut-il saisir ?
Saisissez les standards sous forme de paires concentration en µg/mL et A595, puis les absorbances A595 des échantillons inconnus.
Le facteur de dilution est-il pris en compte ?
Oui. Le facteur indiqué est multiplié par la concentration calculée dans l’essai pour obtenir celle de l’échantillon d’origine.
Quelles unités sont fournies ?
Les résultats sont fournis en µg/mL et, lorsque disponible, en mg/mL.
Que signifie une extrapolation ?
Une extrapolation indique que l’absorbance de l’échantillon se situe en dehors de la plage couverte par les standards.
Pourquoi utiliser le même tampon pour standards et échantillons ?
Le dosage Bradford est sensible à la composition du milieu, notamment aux détergents. Les standards et échantillons doivent donc être préparés dans un tampon comparable.
L’ajustement donne A = 0,01c + 0,05, avec R² = 1,00. La concentration dans l’essai est de 30 µg/mL ; après correction de la dilution, le lysat contient 300,00 µg/mL, soit 0,30 mg/mL.