¿Qué significa el ratio A260/A280?

Es la absorbancia a 260 nm dividida por la absorbancia a 280 nm. Ayuda a valorar la pureza de una muestra de ADN o ARN frente a posibles restos de proteína o fenol.

¿Cuál es un buen ratio para el ADN?

El ADN puro suele estar cerca de 1,8; la ventana orientativa es 1,7–2,0.

¿Cuál es un buen ratio para el ARN?

El ARN puro suele estar cerca de 2,0; la ventana orientativa es 1,8–2,2.

¿Para qué sirve introducir A230?

Permite calcular A260/A230. Un valor puro suele estar entre 2,0 y 2,2; un valor menor puede indicar restos de guanidina, fenol, carbohidratos o sales.

¿Son fiables los ratios con absorbancias muy bajas?

No siempre. Con lecturas inferiores a aproximadamente 0,05, el ratio puede no ser fiable y debe interpretarse con precaución.

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Calculadora de pureza de ácidos nucleicos (OD260/280)

Evalúa la pureza de ácidos nucleicos por el ratio OD260/280: las bases absorben máximo a 260 nm y los aminoácidos aromáticos (y el fenol) cerca de 280 nm, así que A260/A280 diagnostica arrastre de proteína/fenol. Valores esperados: ADN puro ≈ 1.8 (ventana 1.7–2.0), ARN puro ≈ 2.0 (ventana 1.8–2.2); ADN < 1.7 o ARN < 1.8 indica contaminación por proteína/fenol/guanidina, ADN > 2.0 sugiere contaminación con ARN, ARN > 2.2 apunta a artefacto de medición (baja fuerza iónica). Campo opcional A230 para el ratio secundario A260/A230 (puro 2.0–2.2; menor indica guanidina/fenol/carbohidratos/sales). Con lecturas < ~0.05 el ratio no es fiable. Fuentes: Manchester 1995, Sambrook & Russell, Thermo Fisher T042. Solo educación y planificación.

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1. Preparación de ADN limpio: OD260/280 = 1,8

2. Preparación de ARN con posible contaminación

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Calculadora de concentración de ADN (absorbancia A260)

Calculadora de pureza OD260/230 (contaminación por sales/disolventes)

Calculadora de concentración de ARN (A260, 1 OD = 40 µg/mL)

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