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用 A260 紫外吸光度法测定 RNA 浓度：浓度 (µg/mL) = A260 × 稀释倍数 × 40 ÷ 光程 (cm)。RNA 的经验系数为 1 OD = 40 µg/mL，介于双链 DNA（50）与单链 DNA（33）之间；常见操作失误是沿用 dsDNA 的 50，会高估 RNA 产量 25%。1 µg/mL = 1 ng/µL；输入洗脱体积即可得总量 µg。附带 0.1–1.5 线性范围判读；纯 RNA 的 OD260/280 应接近 2.0（DNA 约 1.8），纯度请用配套比值工具判断，操作注意无 RNase、置冰。来源：Marmur & Doty 1961/1962、Sambrook & Russell、Manchester 1995、Thermo Fisher NanoDrop。仅供教学与实验规划，请以校准仪器为准。
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案例
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工具使用指南
RNA 浓度计算器根据 A260 吸光度、稀释倍数和光程计算 RNA 浓度，采用 1 OD = 40 µg/mL 的经验系数，并同时换算为 ng/µL；输入洗脱体积后，还可估算 RNA 总量和判断读数是否处于 0.1–1.5 的线性范围。
背景
样品经过 1:5 稀释，在 1 cm 比色皿中测得 A260 = 0.4，洗脱体积为 250 µL。
问题
需要计算原始 RNA 浓度，并估算整管洗脱液中的 RNA 总量。
如何使用
输入 A260 0.4、稀释倍数 5、光程 1 cm 和样品体积 250 µL。
A260：0.4；稀释倍数：5；光程：1 cm；样品体积：250 µL；小数位数：2。结果
RNA 浓度为 80 µg/mL，即 80 ng/µL；250 µL 洗脱液中约含 20 µg RNA，读数处于 0.1–1.5 线性范围内。
背景
未稀释 RNA 样品在 1 cm 光程下测得 A260 = 0.08，样品体积为 50 µL。
问题
需要了解低吸光度读数对应的浓度，同时确认该读数是否低于建议线性范围。
如何使用
输入 A260 0.08、稀释倍数 1、光程 1 cm 和样品体积 50 µL。
A260：0.08；稀释倍数：1；光程：1 cm；样品体积：50 µL；小数位数：2。结果
计算浓度为 3.2 µg/mL，即 3.2 ng/µL；总量约为 0.16 µg，工具会标记该读数低于 0.1–1.5 线性范围，提示结果可靠性有限。
使用 RNA 的经验系数 1 OD = 40 µg/mL，不应直接沿用双链 DNA 的 50。
填写测量前样品相对于原样的总稀释倍数；未稀释测量时填写 1。
可以，在“光程（cm）”中输入实际光程，例如微量检测器常见的 0.1–1 cm。
工具会根据浓度和洗脱体积估算 RNA 总量，单位为 µg；输入 0 可跳过总量计算。
不会。本工具主要计算浓度和总量；纯 RNA 的 OD260/280 通常接近 2.0，纯度应使用配套比值工具判断。