1. 40倍荧光显微镜图像标尺校准
细胞生物学研究员背景
在观察 HeLa 细胞的免疫荧光染色时,研究员使用 40× 物镜和 1.0 NA 的镜头拍摄了一张 2048×1536 像素的图像,需要为论文插图添加 20 µm 的比例尺。
问题
无法确定图像中每个像素代表的实际物理尺寸,且需要一个透明的矢量比例尺叠加到图像右下角。
如何使用
输入图像宽度 2048 px、高度 1536 px,相机像元 3.45 µm,物镜倍率 40,中继镜倍率 1,波长 550 nm,NA 1.0,标尺长度设为 20 µm,位置选择右下角。
imageWidthPx: 2048, imageHeightPx: 1536, cameraPixelSizeUm: 3.45, objectiveMagnification: 40, relayMagnification: 1, binning: 1, wavelengthNm: 550, numericalAperture: 1, barLengthUm: 20, barColor: '#ffffff', barPosition: 'bottom-right'结果
计算出物方分辨率为 0.08625 µm/px,实际视野为 176.64 µm × 132.48 µm,并成功下载了右下角带有“20 µm”字样的白色透明 SVG 标尺。