Elysia Tools
导航
Education
按 Bradford 法（考马斯亮蓝 G-250，595 nm）由 BSA 标准曲线定量蛋白：粘贴“浓度(µg/mL), A595”标准曲线数据与待测孔吸光度，工具做最小二乘拟合（给出斜率、截距、R²），反算 c = (A−b)/m，再乘以稀释倍数输出 µg/mL 与 mg/mL。超出标准范围的读数标记为外推；低于空白的读数判为不可定量。要点：染料响应随蛋白不同差异大（BSA 约为 IgG 的两倍），高去垢剂不适；配制标准品须与样品同缓冲液。来源：Bradford 1976 Anal Biochem。仅供教学与实验规划。
执行
填写表单、运行工具，并在同一页面查看结果。
案例
相关内容
等待运行
工具使用指南
Bradford 法蛋白定量计算器使用 BSA 标准品的浓度与 A595 数据进行最小二乘线性拟合，计算斜率、截距和 R²，并根据待测吸光度反算蛋白浓度，结合稀释倍数输出 µg/mL 与 mg/mL。
背景
实验得到四个 BSA 标准品数据，A595 与浓度呈线性关系，并需要计算两个未知孔的蛋白浓度。
问题
希望确认标准曲线拟合质量，并快速将 A595 读数换算为蛋白浓度。
如何使用
在标准品输入框粘贴四行数据，在待测吸光度框输入 0.50 和 0.25，稀释倍数填写 1。
标准品：0, 0.000；10, 0.200；20, 0.400；40, 0.800。待测 A595：0.50、0.25。小数位数：2。结果
拟合得到斜率 0.02、截距 0、R² = 1.00；两个样品分别为 25.00 µg/mL 和 12.50 µg/mL，即 0.025 mg/mL 和 0.0125 mg/mL。
背景
裂解液在 Bradford 测定前稀释了 10 倍，标准曲线具有非零截距，需要根据一个未知孔的 A595 计算原样品浓度。
问题
测定孔浓度为 30 µg/mL，但需要还原为稀释前样品的蛋白浓度。
如何使用
输入标准品数据 0/25/50/100 µg/mL 对应的 A595，待测吸光度填写 0.35，稀释倍数填写 10。
标准品：0, 0.050；25, 0.300；50, 0.550；100, 1.050。待测 A595：0.35。小数位数：2。结果
拟合得到 A = 0.01c + 0.05、R² = 1.00；测定体系浓度为 30 µg/mL，乘以 10 倍稀释后，原样品浓度为 300.00 µg/mL，即 0.30 mg/mL。
需要输入 BSA 标准品的浓度与 A595，以及待测样品的 A595 吸光度和稀释倍数。
每行填写一个标准品，格式为“浓度（µg/mL）, A595”，例如“10, 0.200”。
结果包括拟合斜率、截距、R²，以及各待测样品的 µg/mL 和 mg/mL 浓度。
工具先计算测定体系中的浓度，再乘以输入的稀释倍数，得到原样品浓度。未稀释样品应填写 1。
工具会将其标记为外推；低于空白的读数则判为不可定量。外推结果应谨慎解释。