1. 大肠杆菌对数中期密度
分子生物学实验员背景
摇瓶培养大肠杆菌,未稀释样品测得 OD600 为 0.45,无菌培养基空白为 0.02。
问题
把吸光度换成 CFU/mL,判断是否处于对数中期线性范围。
如何使用
实测 OD600 填 0.45,空白填 0.02,菌种选大肠杆菌预设,稀释倍数填 1。
od600=0.45, blankOd=0.02, organism=ecoli, sampleDilution=1
结果
净 OD 0.43,按 1×10⁹ CFU/OD 得到约 4.3×10⁸ CFU/mL,处于线性范围内。
2. 稀释后枯草芽孢杆菌浓度与总 CFU
发酵实验室技术员背景
培养物较浓,稀释 10 倍后 OD600 为 0.85,空白为 0,培养物总体积 25 mL。
问题
回算原液 CFU/mL 并估算整瓶总活菌数,同时核对是否超出线性范围。
如何使用
OD600 填 0.85,空白 0,菌种选枯草芽孢杆菌,稀释倍数 10,培养物体积 25。
od600=0.85, blankOd=0, organism=bsub, sampleDilution=10, cultureVolumeMl=25
结果
约 4.25×10⁹ CFU/mL,25 mL 中约 1.06×10¹¹ 总 CFU;净 OD 高于约 0.6,工具提醒应进一步稀释后重测。