Conversão OD600 → CFU/mL (inclinação de calibração)
Converte OD600 em concentração viável pela inclinação de calibração: CFU/mL = (OD600 − branco) × fator × diluição. O fator são as CFU/mL em OD600 = 1 e depende muito de cepa, meio e espectrofotômetro; as predefinições são apenas ordens de grandeza: E. coli ≈ 1×10⁹, B. subtilis ≈ 5×10⁸, S. cerevisiae ≈ 1×10⁷. Calibre por contagem em placa. A linearidade vai só até ~0.2–0.6; acima de OD líquido 0.6 a ferramenta sugere diluir. Volume opcional para CFU total.
Execução
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Exemplos
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Guia de uso da ferramenta
Veja quando usar esta ferramenta, o que ela suporta e como os usuários a aplicam.
Fatos principais
Categoria
Health
Tipos de entrada
number, select
Tipo de saída
json
Cobertura de exemplos
4
API pronta
Sim
Visão geral
Converta leituras de OD600 em concentração de células viáveis (CFU/mL) pela inclinação de calibração: CFU/mL = (OD600 − branco) × fator × diluição. Use predefinições de ordem de grandeza para E. coli, B. subtilis e S. cerevisiae ou um fator próprio; informe a diluição da amostra e, se quiser, o volume da cultura para o CFU total. A ferramenta alerta quando o OD líquido ultrapassa a faixa linear típica de cerca de 0,2–0,6.
Quando usar
Quando precisar estimar a densidade celular viável a partir de uma leitura de espectrofotômetro a 600 nm.
Para acompanhar curvas de crescimento sem contar placas em todos os pontos.
Antes de inocular ou diluir, para calcular o volume de cultura a partir da concentração estimada.
Como funciona
1Informe o OD600 bruto da amostra e, se disponível, o OD600 do branco (meio estéril).
2Escolha a predefinição de calibração (E. coli 1×10⁹, B. subtilis 5×10⁸ ou S. cerevisiae 1×10⁷ UFC por unidade de OD) ou um fator personalizado obtido por plaqueamento.
3Indique o fator de diluição da amostra antes da leitura (1 = sem diluição) e, opcionalmente, o volume da cultura em mL.
4A ferramenta calcula o CFU/mL e avisa se o OD líquido estiver acima de ~0,6, fora da faixa linear.
Casos de uso
Padronizar inóculo de E. coli a partir de uma leitura de OD600 em meio líquido.
Acompanhar o crescimento de B. subtilis com correção de diluição e aviso de faixa linear.
Estimar biomassa de S. cerevisiae e calcular o total de UFC no frasco ou fermentador.
Exemplos
1. E. coli em fase log com correção de branco
Pesquisador de microbiologia
Contexto
Uma cultura de E. coli em LB precisa ser padronizada para um experimento de expressão ou transformação.
Problema
Converter OD600 0,45 (branco 0,02) em CFU/mL sem diluição prévia.
Como usar
Informe OD600 0,45, branco 0,02, predefinição E. coli e diluição 1.
Resultado
OD líquido 0,43 × 1×10⁹ = 4,3×10⁸ CFU/mL, dentro da faixa linear.
2. B. subtilis diluída 10× com volume total
Técnico de laboratório
Contexto
A cultura de B. subtilis está densa demais; a amostra foi diluída 10 vezes antes da leitura.
Problema
Obter a concentração da cultura original e o total de UFC em 25 mL, com o aviso de linearidade.
Como usar
Informe OD600 0,85, branco 0, predefinição B. subtilis, diluição 10 e volume 25 mL.
Resultado
Aproximadamente 4,25×10⁹ CFU/mL (aviso: OD líquido acima de 0,6). Total cerca de 1,06×10¹¹ UFC em 25 mL.
Perguntas frequentes
Como é calculado o CFU/mL?
CFU/mL = (OD600 medido − OD600 do branco) × fator de calibração × diluição da amostra. O fator corresponde às CFU/mL em OD600 = 1.
As predefinições são precisas para qualquer cepa?
Não. São apenas ordens de grandeza. O fator depende da cepa, do meio e do espectrofotômetro; calibre por contagem em placa.
O que significa o aviso de linearidade?
A relação OD600–densidade costuma ser linear só até cerca de 0,2–0,6. Se o OD líquido for maior que 0,6, dilua a amostra e meça de novo.
O volume da cultura é obrigatório?
Não. Deixe em branco se só precisar da concentração em CFU/mL. Informe o volume apenas para obter o CFU total.
Posso usar um fator de calibração próprio?
Sim. Selecione fator de calibração personalizado e informe as CFU/mL correspondentes a OD600 = 1 da sua curva.