1. 流式细胞术:500 个细胞中 150 个 GFP 阳性
细胞实验人员背景
流式细胞术获得 500 个活细胞的单细胞计数,其中 150 个细胞超过 GFP 判定阈值。
问题
需要计算 GFP 质粒转染效率,并了解单次计数结果的不确定性。
如何使用
选择“单次测量”,输入总细胞数 500、GFP 阳性细胞数 150,并将小数位数设为 2。
mode:单次测量;totalCells:500;gfpPositiveCells:150;decimalPlaces:2
结果
转染效率为 30%,Wilson 95% 置信区间约为 26.15%–34.16%,结果判为“良好”。
2. 三个显微镜视野:计算均值和样本标准差
显微镜计数人员背景
三个重复荧光视野分别统计了 120/480、155/510 和 130/505 个 GFP 阳性细胞与总细胞。
问题
需要查看每个视野的转染效率,并汇总多个视野的平均水平和离散程度。
如何使用
选择“多复孔/多视野”,输入总细胞数“480, 510, 505”和 GFP 阳性数“120, 155, 130”。
mode:多复孔/多视野;replicateTotals:480, 510, 505;replicateGfp:120, 155, 130;decimalPlaces:2
结果
三个视野效率分别为 25.00%、30.39% 和 25.74%,均值为 27.04%,样本标准差为 2.92 个百分点。