Calculateur de la loi de Beer-Lambert

Calculateur de la loi de Beer-Lambert | Outil en ligne gratuit | Elysia Tools

Guide d'utilisation de l'outil

Découvrez quand utiliser cet outil, ce qu'il prend en charge et comment les utilisateurs l'appliquent.

Points clés

Catégorie: Science & Education
Types d’entrée: select, number
Type de sortie: text
Exemples associés: 4
API disponible: Oui

Aperçu

Ce calculateur applique la loi de Beer-Lambert (A = ε·c·l) pour déterminer l'absorbance ou la concentration molaire d'une solution spectrophotométrique. Il calcule simultanément la transmittance (T = 10⁻ᴬ et %T), prend en charge les conversions d'unités usuelles et signale les mesures situées hors de la plage de linéarité recommandée de 0,05 à 1,0.

Quand l’utiliser

Calculer la concentration inconnue d'un échantillon à partir d'une absorbance lue au spectrophotomètre.
Estimer l'absorbance théorique et le pourcentage de transmittance d'une solution étalon avant analyse.
Vérifier si une mesure optique se situe dans la plage de travail linéaire optimale (0,05 à 1,0) pour éviter les erreurs de saturation.

Fonctionnement

1Sélectionnez la grandeur cible à calculer : Absorbance (A) ou Concentration (c).
2Indiquez le coefficient d'absorptivité molaire ε (L·mol⁻¹·cm⁻¹) et la longueur du trajet optique l (cm ou mm).
3Saisissez la concentration connue (avec son unité mol/L, mmol/L ou µmol/L) ou l'absorbance mesurée pour obtenir instantanément le résultat et la transmittance associée.

Cas d’usage

Suivi cinétique et dosages enzymatiques utilisant la disparition ou l'apparition de NADH à 340 nm.
Quantification de solutions chimiques et de biomolécules par spectrophotométrie UV-Visible.
Contrôle de dilution et vérification de la conformité optique d'échantillons de laboratoire.

Exemples

1. Calcul de l'absorbance théorique du NADH à 340 nm

Enzymologiste

Contexte

Un protocole expérimental requiert une solution de contrôle de NADH à 100 µM lue à 340 nm dans une cuve de 1 cm.

Problème

Vérifier l'absorbance attendue et le niveau de transmittance avant de lancer la cinétique.

Utilisation

Sélectionner le mode Absorbance, définir ε = 6220 L·mol⁻¹·cm⁻¹, c = 100 µM et l = 1 cm.

Résultat

L'outil calcule A = 0,622 et une transmittance T = 23,88 %, confirmant que la mesure s'inscrit dans la plage linéaire idéale.

2. Dosage quantitatif d'un échantillon inconnu

Technicien de laboratoire

Contexte

Après incubation, un spectrophotomètre affiche une valeur d'absorbance brute de 0,30 à 340 nm pour une cuve de 1 cm.

Problème

Déterminer la concentration exacte de NADH correspondant à cette lecture optique.

Utilisation

Sélectionner le mode Concentration, renseigner ε = 6220 L·mol⁻¹·cm⁻¹, l = 1 cm et saisir une absorbance de 0,30.

Résultat

Le calculateur résout la concentration à 48,23 µmol/L (4,823×10⁻⁵ mol/L) avec une transmittance de 50,12 %.

FAQ

Quelle est la formule de la loi de Beer-Lambert ?

La relation fondamentale est A = ε·c·l, où A est l'absorbance (sans unité), ε l'absorptivité molaire (L·mol⁻¹·cm⁻¹), c la concentration (mol/L) et l le trajet optique (cm).

Pourquoi la plage d'absorbance recommandée est-elle de 0,05 à 1,0 ?

En dessous de 0,05, le bruit instrumental dégrade la précision, et au-dessus de 1,0, la lumière parasite et la saturation du détecteur entraînent une perte de linéarité.

Comment la transmittance est-elle déduite de l'absorbance ?

La transmittance décimale suit la formule T = 10⁻ᴬ, puis est multipliée par 100 pour obtenir le pourcentage de lumière transmise (%T).

Quelles unités de concentration peuvent être renseignées ?

L'outil gère les moles par litre (mol/L), les millimoles par litre (mmol/L) et les micromoles par litre (µmol/L) avec conversion automatique.

Peut-on utiliser des cuves de spectrophotométrie de longueur différente de 1 cm ?

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