Calculadora de la ley de Beer-Lambert

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Guía de uso de la herramienta

Conoce cuándo usar esta herramienta, qué admite y cómo la aplican los usuarios.

Datos clave

Categoría: Science & Education
Tipos de entrada: select, number
Tipo de salida: text
Cobertura de ejemplos: 4
API disponible: Sí

Resumen

Esta calculadora aplica la ley de Beer-Lambert (A = ε·c·l) de forma bidireccional para determinar la absorbancia teórica o despejar la concentración a partir de una lectura espectrofotométrica. Convierte automáticamente las unidades de concentración y paso de luz, calcula la transmitancia asociada (T y %T) y evalúa si la lectura se sitúa dentro del rango lineal de trabajo habitual (0.05 a 1.0).

Cuándo usarlo

Al cuantificar la concentración molar de solutos a partir de mediciones de absorbancia en el espectrofotómetro.
Al planificar diluciones experimentales para asegurar que la absorbancia teórica caiga en el rango lineal óptimo.
Al calibrar y verificar ensayos enzimáticos o cinéticos espectrofotométricos (como el seguimiento de NADH a 340 nm).

Cómo funciona

1Seleccione el modo de cálculo deseado: determinar absorbancia (A) o calcular concentración (c).
2Introduzca el coeficiente de absortividad molar (ε) del compuesto y la longitud del paso óptico (l) en cm o mm.
3Indique la concentración de la muestra (en M, mM o µM) o la absorbancia medida según el modo seleccionado.
4La herramienta calcula la variable restante junto con la transmitancia equivalente (T = 10⁻ᴬ) y su porcentaje correspondiente.

Casos de uso

Cuantificación espectrofotométrica directa de biomoléculas y colorantes en cubeta estándar.
Seguimiento de consumo o producción de cofactores como NADH/NADPH en ensayos enzimáticos.
Determinación del factor de dilución necesario para muestras con absorbancia saturada.

Ejemplos

1. Cálculo de absorbancia para solución de NADH

Investigador en bioquímica

Contexto

Se prepara un ensayo cinético acoplado monitorizando el consumo de NADH a 340 nm con cubeta estándar de 1 cm.

Problema

Predecir la absorbancia inicial de una disolución 100 µM para comprobar si entra en la escala lineal del lector.

Cómo usarlo

Seleccionar el modo de absorbancia, fijar ε en 6220 L·mol⁻¹·cm⁻¹, concentración en 100 µM y camino en 1 cm.

mode: absorbance, epsilon: 6220, c: 100, cUnit: uM, l: 1, lUnit: cm

Resultado

Absorbancia A = 0.622 y transmitancia T = 23.88%, un valor dentro del rango de trabajo ideal.

2. Cuantificación de muestra desconocida

Técnico de laboratorio analítico

Contexto

Se mide una muestra tras una reacción enzimática y el espectrofotómetro arroja una absorbancia de 0.30 a 340 nm.

Problema

Calcular la concentración micromolar exacta de analito en la cubeta.

Cómo usarlo

Seleccionar el modo de concentración, introducir ε = 6220, l = 1 cm y A = 0.30.

Preguntas frecuentes

¿Qué ecuación utiliza la calculadora?

Utiliza la relación fundamental A = ε·c·l para la absorbancia y T = 10⁻ᴬ para la transmitancia óptica.

¿Por qué es importante el rango de absorbancia de 0.05 a 1.0?

Dentro de 0.05 y 1.0 la respuesta del detector mantiene una linealidad fiable, minimizando errores por luz dispersa o saturación.

¿Cómo se despeja la concentración?

Se calcula mediante la fórmula c = A / (ε·l), convirtiendo automáticamente los resultados a M, mM y µM.

¿Qué unidades admite para el paso óptico?

Permite trabajar con cubetas estándar en centímetros (cm) y microcubetas o placas en milímetros (mm).

¿En qué unidades debe expresarse la absortividad molar (ε)?

Debe introducirse en litros por mol por centímetro (L·mol⁻¹·cm⁻¹).

mode: concentration, epsilon: 6220, l: 1, lUnit: cm, absorbance: 0.3

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1. Cálculo de absorbancia para solución de NADH

2. Cuantificación de muestra desconocida

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