Калькулятор закона Бугера-Ламберта-Бера | Бесплатный онлайн-инструмент | Elysia Tools
Elysia Tools
Навигация
Science & Education
Калькулятор закона Бугера-Ламберта-Бера
Закон Бугера-Ламберта-Бера A = ε·c·l в обе стороны: поглощение по концентрации или концентрация по измеренному поглощению (повседневный путь количественного анализа). Пропускание T = 10⁻ᴬ идёт рядом, а выход за линейный рабочий диапазон 0.05–1.0 отмечается предупреждением. Опора: НАДН при 340 нм имеет ε = 6220 л·моль⁻¹·см⁻¹, поэтому 100 мкМ в кювете 1 см даёт ровно A = 0.622 — калибровочная точка, на которой стоит половина энзимологии.
Запуск
Запустить этот инструмент
Заполните форму, запустите инструмент и посмотрите результат на этой же странице.
Примеры
Примеры для этого инструмента
Связано
Продолжить с похожими инструментами и темами
Руководство по использованию инструмента
Узнайте, когда использовать этот инструмент, что он поддерживает и как его применяют пользователи.
Ключевые факты
Категория
Science & Education
Типы ввода
select, number
Тип вывода
text
Покрытие примерами
4
API доступен
Да
Обзор
Калькулятор закона Бугера-Ламберта-Бера позволяет выполнять двусторонние спектрофотометрические расчеты: определять оптическую плотность (A) по известной концентрации вещества или рассчитывать концентрацию (c) по измеренному поглощению. Инструмент автоматически пересчитывает единицы измерения, вычисляет коэффициент пропускания (T и %T) и контролирует попадание значений в оптимальный линейный рабочий диапазон 0,05–1,0.
Когда использовать
При пересчете измеренной оптической плотности образца в молярную концентрацию в ходе количественного спектрофотометрического анализа.
При планировании экспериментов и разведений растворов для попадания оптической плотности в линейный диапазон спектрофотометра (0,05–1,0).
При анализе кинетики ферментативных реакций по изменению поглощения кофакторов (например, НАДН или НАДФН при 340 нм).
Как это работает
1Выберите режим расчета: расчет поглощения (A) по концентрации либо расчет концентрации (c) по измеренному поглощению.
2Укажите молярный коэффициент поглощения (ε) исследуемого вещества и длину оптического пути кюветы (в см или мм).
3Введите исходную концентрацию с выбором единиц (моль/л, ммоль/л, мкмоль/л) либо измеренное значение оптической плотности A.
4Получите результат расчета по формуле A = ε·c·l или c = A/(ε·l), а также величину пропускания T и предупреждение при выходе за пределы диапазона точности.
Сценарии использования
Определение концентрации белков, нуклеиновых кислот или красителей в растворе по калибровочному коэффициенту экстинкции.
Контроль чистоты и количественная оценка коферментов НАДН / НАДФН в биохимических тестах при длине волны 340 нм.
Быстрая оценка оптического пропускания растворов в аналитических и учебных лабораториях.
Примеры
1. Оценка поглощения раствора НАДН при 340 нм
Биохимик
Контекст
Проводится подготовка стандартного раствора НАДН для энзиматического теста в стандартной кварцевой кювете с длиной пути 1 см.
Проблема
Необходимо убедиться, что раствор с концентрацией 100 мкМ не превысит верхний предел линейного диапазона прибора.
Как использовать
Выберите режим «Поглощение (A)», укажите ε = 6220, концентрацию 100 мкмоль/л и длину пути 1 см.
Результат
Калькулятор выдает A = 0.622 и пропускание T = 23.88%, что идеально укладывается в оптимальный рабочий диапазон спектрофотометра.
2. Определение концентрации пробы по измеренному поглощению
Лаборант-аналитик
Контекст
После проведения ферментативной реакции спектрофотометр зафиксировал оптическую плотность образца 0.30 при 340 нм в кювете 1 см.
Проблема
Требуется перевести измеренное значение A в точную микромолярную концентрацию продукта.
Как использовать
Выберите режим «Концентрация (c)», задайте ε = 6220, измеренное A = 0.30 и длину пути 1 см.
Результат
FAQ
Какая формула лежит в основе расчетов?
Используется уравнение закона Бугера-Ламберта-Бера: A = ε·c·l, где A — оптическая плотность, ε — молярный коэффициент поглощения (л·моль⁻¹·см⁻¹), c — концентрация (моль/л), а l — длина оптического пути (см).
Почему важен рабочий диапазон оптической плотности 0,05–1,0?
Вне этого интервала резко возрастает инструментальная погрешность детектора: при A < 0,05 сигнал трудно отличить от шума, а при A > 1,0 свет поглощается более чем на 90%, вызывая отклонения от линейности.
Как рассчитывается коэффициент пропускания света T?
Пропускание вычисляется по формуле T = 10⁻ᴬ, где A — поглощение. Для перевода в проценты полученное значение умножается на 100%.
Какие единицы измерения концентрации поддерживаются?
Калькулятор поддерживает ввод концентрации в моль/л (M), миллимоль/л (mM) и микромоль/л (uM) с автоматическим приведением к размерности коэффициента ε.
Можно ли использовать кюветы с нестандартной длиной пути?