Molarer Extinktionskoeffizient und Beer-Lambert-Gesetz (A = ε·c·l)

Molarer Extinktionskoeffizient und Beer-Lambert-Gesetz (A = ε·c·l) | Kostenloses Online-Tool | Elysia Tools

Leitfaden zur Tool-Nutzung

Erfahren Sie, wann dieses Tool passt, was es unterstützt und wie Nutzer es anwenden.

Wichtige Fakten

Kategorie: Education
Eingabetypen: select, number
Ausgabetyp: json
Sample-Abdeckung: 4
API bereit: Ja

Überblick

Dieser Rechner löst das Lambert-Beer-Gesetz (A = ε·c·l) flexibel nach einer der vier physikalischen Größen auf: Absorbanz, molarer Extinktionskoeffizient, Konzentration oder optische Schichtdicke. Mit automatischer Einheitenumrechnung für Konzentrationen von M bis nM sowie Küvettenschichtdicken in cm und mm liefert das Tool präzise Ergebnisse für spektrophotometrische Analysen im Laboralltag.

Wann verwenden

Wenn aus einer gemessenen Absorbanz am Photometer direkt die Probenkonzentration ermittelt werden soll.
Wenn der molare Extinktionskoeffizient ε einer neu synthetisierten Substanz oder eines Farbstoffs experimentell bestimmt werden muss.
Wenn vor einem photometrischen Enzymtest (z. B. NADH-Umsatz bei 340 nm) die zu erwartende Absorbanz berechnet werden soll.

So funktioniert es

1Wählen Sie im Feld 'Berechnen' die gesuchte Zielgröße aus (Absorbanz, Extinktionskoeffizient, Konzentration oder Schichtdicke).
2Geben Sie die Werte der drei bekannten Parameter ein und wählen Sie die passenden Einheiten für Konzentration (M, mM, µM, nM) und Schichtdicke (cm, mm).
3Legen Sie optional die gewünschte Anzahl der Dezimalstellen für die Ausgabe fest.
4Der Rechner wandelt alle Werte intern in die Basiseinheiten (mol/L und cm) um, wendet die Formel A = ε·c·l an und gibt das berechnete Ergebnis aus.

Anwendungsfälle

Quantitative Konzentrationsbestimmung von Nukleinsäuren, Proteinen oder niedermolekularen Substanzen.
Berechnung von Reaktionsgeschwindigkeiten und Substratumsätzen in NADH/NADPH-gekoppelten Enzymassays.
Charakterisierung neuer Farbstoffe und fluorophorer Gruppen durch Ermittlung des spezifischen Extinktionskoeffizienten.

Beispiele

1. Absorbanzkontrolle für einen NADH-Enzymtest

Biochemie-Laborant

Hintergrund

In einem enzymatischen Testansatz liegt eine NADH-Konzentration von 100 µM vor, die bei 340 nm in einer 1-cm-Standardküvette gemessen werden soll.

Aufgabe

Überprüfung der theoretischen Absorbanz vor Beginn der kinetischen Messung zur Vermeidung von Detektorsättigung.

Verwendung

Wählen Sie 'Absorbanz (A)' als Zielgröße, tragen Sie ε = 6220, Konzentration = 100 mit Einheit 'µM' und Schichtdicke = 1 mit Einheit 'cm' ein.

solveFor: absorbance, extinctionCoeff: 6220, concentration: 100, concUnit: uM, pathLength: 1, lengthUnit: cm, decimalPlaces: 4

Ergebnis

Der Rechner ermittelt eine Absorbanz von genau 0,6220, was im optimalen linearen Messbereich des Spektrophotometers liegt.

2. Bestimmung des molaren Extinktionskoeffizienten eines Farbstoffs

Doktorandin der Organischen Chemie

Hintergrund

Eine neu synthetisierte Farbstofflösung mit einer Konzentration von 50 µM liefert bei einer Schichtdicke von 1 cm eine Absorbanz von 1,200.

Aufgabe

Ermittlung des exakten molaren Extinktionskoeffizienten ε für die Publikation.

FAQ

Welche Grundformel verwendet der Rechner?

Er verwendet das Lambert-Beer-Gesetz: Absorbanz (A) = molarer Extinktionskoeffizient (ε) × Konzentration (c) × Schichtdicke (l).

Welche Einheiten werden für den Extinktionskoeffizienten ε verwendet?

Der molare Extinktionskoeffizient wird standardmäßig in M⁻¹cm⁻¹ (L·mol⁻¹·cm⁻¹) berechnet und angegeben.

Kann ich Schichtdicken von Mikrotiterplatten oder Nanodrop-Messungen eingeben?

Ja, Sie können die Schichtdicke wahlweise in Zentimetern (cm) oder Millimetern (mm) angeben.

Welcher Referenzwert gilt für NADH bei 340 nm?

Für NADH bei 340 nm wird üblicherweise der Literaturwert ε = 6220 M⁻¹cm⁻¹ verwendet.

Ist die Absorbanz ein dimensionsloser Wert?

Ja, die optische Dichte bzw. Absorbanz (A) besitzt keine physikalische Einheit.

solveFor: extinctionCoefficient, absorbance: 1.2, concentration: 50, concUnit: uM, pathLength: 1, lengthUnit: cm, decimalPlaces: 2

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Anwendungsfälle

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1. Absorbanzkontrolle für einen NADH-Enzymtest

2. Bestimmung des molaren Extinktionskoeffizienten eines Farbstoffs

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