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Coeficiente de Extinción Molar y Ley de Beer-Lambert (A = ε·c·l)

· Última actualización：2026-08-22

Resuelve cualquiera de las cuatro magnitudes de la ley de Beer-Lambert A = ε·c·l a partir de las otras tres: absorbancia A, coeficiente de extinción molar ε (M⁻¹cm⁻¹), concentración (M/mM/µM/nM) o camino óptico (cm/mm). Incluye el ancla clásico NADH ε340 = 6220 M⁻¹cm⁻¹ (100 µM en cubeta de 1 cm → A = 0,622), base de los ensayos de actividad enzimática.

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Guía de uso de la herramienta

Conoce cuándo usar esta herramienta, qué admite y cómo la aplican los usuarios.

Datos clave

Categoría
Education
Tipos de entrada
select, number
Tipo de salida
json
Cobertura de ejemplos
4
API disponible
Sí

Resumen

Calcula de forma inmediata cualquiera de las cuatro variables de la ley de Beer-Lambert (A = ε·c·l): absorbancia, coeficiente de extinción molar, concentración o longitud del camino óptico, con soporte para múltiples unidades de medida.

Cuándo usarlo

  • Al determinar la concentración de muestras biológicas o químicas a partir de su absorbancia leída en espectrofotómetro.
  • Al caracterizar nuevas moléculas o cromóforos calculando experimentalmente su coeficiente de extinción molar (ε).
  • Al adaptar protocolos espectrofotométricos a cubetas o microcubetas con longitudes de paso óptico en centímetros o milímetros.

Cómo funciona

  1. 1Selecciona la variable desconocida que deseas calcular: absorbancia (A), coeficiente de extinción (ε), concentración (c) o longitud de camino óptico (l).
  2. 2Ingresa los valores conocidos de las otras tres magnitudes y selecciona sus unidades (M, mM, µM, nM para concentración; cm o mm para longitud).
  3. 3Ajusta el número de decimales para obtener el resultado matemático formateado según la relación lineal de Beer-Lambert.

Casos de uso

  • Cuantificación de cofactores como NADH/NADPH a 340 nm en ensayos cinéticos de actividad enzimática.
  • Determinación precisa de concentraciones de ácidos nucleicos, proteínas purificadas y colorantes sintéticos.
  • Cálculo de la absortividad molar de nuevos complejos químicos sintetizados en el laboratorio.

Ejemplos

1. Verificación de absorbancia teórica de NADH a 340 nm

Bioquímico analítico

Contexto

Se prepara una disolución estándar de 100 µM de NADH para contrastar el rendimiento de un espectrofotómetro UV-Vis antes de un ensayo enzimático.

Problema

Calcular la absorbancia teórica esperada en una cubeta de cuarzo de 1 cm.

Cómo usarlo

Seleccionar 'Absorbancia (A)' en 'Calcular', definir ε = 6220 M⁻¹cm⁻¹, concentración = 100 µM y camino óptico = 1 cm.

{"solveFor":"absorbance","extinctionCoeff":6220,"concentration":100,"concUnit":"uM","pathLength":1,"lengthUnit":"cm","decimalPlaces":4}

Resultado

Se obtiene una absorbancia teórica calculada de 0,6220.

2. Determinación del coeficiente de extinción de un cromóforo

Químico de síntesis

Contexto

Se sintetiza un nuevo colorante orgánico y se prepara una solución 50 µM, obteniendo una lectura de absorbancia de 1,200 en cubeta estándar de 1 cm.

Problema

Calcular la absortividad molar ε del compuesto para incluirla en la caracterización analítica.

Cómo usarlo

Preguntas frecuentes

¿En qué unidades se expresa el coeficiente de extinción molar (ε)?

Se expresa en M⁻¹cm⁻¹ (equivalente a L·mol⁻¹·cm⁻¹), reflejando la capacidad de absorción de luz a una longitud de onda específica.

¿Cómo maneja la herramienta las distintas unidades de concentración?

Convierte automáticamente valores en nM, µM o mM a molaridad (M) para realizar el cálculo conforme a la definición estándar de ε.

¿Se pueden utilizar cubetas de paso óptico reducido como 2 mm o 5 mm?

Sí, puedes introducir el valor exacto en milímetros seleccionando 'mm' en la unidad de longitud de camino óptico.

¿La ley de Beer-Lambert es aplicable a cualquier nivel de absorbancia?

Es válida principalmente en el rango lineal del espectrofotómetro, generalmente entre 0,1 y 1,5 unidades de absorbancia.

¿Cuál es el valor estándar de referencia para NADH a 340 nm?

El valor clásico ampliamente utilizado es ε = 6220 M⁻¹cm⁻¹, donde 100 µM en cubeta de 1 cm produce una absorbancia de 0,622.

Tema

Cuantificación por absorbancia y cálculos ácido-base

Convierta lecturas de instrumento en concentraciones defendibles — pase entre absorbancia y transmitancia, resuelva la ley de Beer-Lambert para la variable que falte, recorra la cadena de ácidos nucleicos de A260 a microgramos a nanomolar a copias por microlitro, prediga el pH desde concentraciones de ácidos y bases fuertes, diseñe tampones con Henderson-Hasselbalch y verifique la disociación mediante conductividad molar.

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Conversor Absorbancia↔Transmitancia (A = −log₁₀T)

Convierte en ambos sentidos entre absorbancia y transmitancia: A = −log₁₀(T), T = 10⁻ᴬ, %T = 100·T y A = 2 − log₁₀(%T). Acepta absorbancia A, transmitancia porcentual %T o transmitancia decimal T y devuelve las tres representaciones a la vez. Valores guía: A=0 → %T=100; A=1 → %T=10; A=0,301 → %T=50. Una absorbancia negativa implicaría %T > 100 %, imposible en espectrofotometría estándar, y se rechaza.

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Conversor de unidades de actividad enzimática (U ↔ katal)

Convierte con exactitud entre unidades de actividad enzimática: 1 U = 1 µmol/min (IUB 1978), 1 kat = 1 mol/s (BIPM 1999), luego 1 U = 16,667 nkat, 1 µkat = 60 U y 1 kat = 6×10⁷ U. Introduzca un valor en U/mU/µU o kat/mkat/µkat/nkat/pkat y obtenga la misma actividad en todas las demás unidades a la vez. Conversión pura de escala, sin supuestos de ensayo, útil para manuscritos y fichas técnicas. Fuentes: comité de nomenclatura IUB, BIPM 21.ª CGPM, libro verde IUPAC. Solo para educación.

Education

Calculadora de densidad celular OD600 (E. coli)

Convierte lecturas de turbidez OD600 en concentración celular y peso seco (CDW): OD normalizada = lectura × factor de dilución ÷ camino óptico; células/mL = OD × células por OD (1×10⁹ por defecto, valor habitual de E. coli); CDW g/L = OD × g/L por OD (0.36 por defecto, BioNumbers 109837; rango 0.3–0.5). Ambos factores son editables — cepa, medio e instrumento los modifican; los valores por defecto son autoconsistentes: 0.36 g/L ÷ 10⁹ células/mL = 0.36 pg/célula. Marca lecturas OD > 1 fuera del rango lineal (Sigma-Aldrich). Fuentes: BioNumbers 109835/109837, Agilent/VectorBuilder. Calibre con su propia curva OD-CFU. Solo para educación.

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Calculadora de afinidad proteína-ADN (estimación de Kd)

Estima el Kd a partir de un punto según el equilibrio 1:1: con proteína en exceso, f = [P]÷([P]+Kd), luego Kd = [P]×(1−f)÷f; con f = 0.5 el Kd iguala la concentración de proteína. Dos entradas: fracción unida directa (0–1) o anisotropía de fluorescencia f = (r−rlibre)÷(rligado−rlibre). Añade ΔG° = RT·ln(Kd) (25 °C por defecto). Bandas: <1 nM muy fuerte, 1–100 nM fuerte (dianas típicas de factores transcripcionales), 100 nM–1 µM moderado, >1 µM débil (revisar sal y competidor poly(dI-dC)). Supuestos: equilibrio, 1:1, proteína en gran exceso; para curvas completas ajuste la titulación entera. Fuentes: Cantor & Schimmel, Heyduk & Lee 1990, Lakowicz. Solo para educación.

Seleccionar 'Coeficiente de extinción ε' en 'Calcular', introducir absorbancia = 1,2, concentración = 50 µM y camino óptico = 1 cm.

{"solveFor":"extinctionCoefficient","absorbance":1.2,"concentration":50,"concUnit":"uM","pathLength":1,"lengthUnit":"cm","decimalPlaces":2}

Resultado

Se determina un coeficiente de extinción molar ε de 24 000 M⁻¹cm⁻¹.