Coeficiente de Extinción Molar y Ley de Beer-Lambert (A = ε·c·l)

Coeficiente de Extinción Molar y Ley de Beer-Lambert (A = ε·c·l) | Herramienta online gratis | Elysia Tools

Guía de uso de la herramienta

Conoce cuándo usar esta herramienta, qué admite y cómo la aplican los usuarios.

Datos clave

Categoría: Education
Tipos de entrada: select, number
Tipo de salida: json
Cobertura de ejemplos: 4
API disponible: Sí

Resumen

Calcula de forma inmediata cualquiera de las cuatro variables de la ley de Beer-Lambert (A = ε·c·l): absorbancia, coeficiente de extinción molar, concentración o longitud del camino óptico, con soporte para múltiples unidades de medida.

Cuándo usarlo

Al determinar la concentración de muestras biológicas o químicas a partir de su absorbancia leída en espectrofotómetro.
Al caracterizar nuevas moléculas o cromóforos calculando experimentalmente su coeficiente de extinción molar (ε).
Al adaptar protocolos espectrofotométricos a cubetas o microcubetas con longitudes de paso óptico en centímetros o milímetros.

Cómo funciona

1Selecciona la variable desconocida que deseas calcular: absorbancia (A), coeficiente de extinción (ε), concentración (c) o longitud de camino óptico (l).
2Ingresa los valores conocidos de las otras tres magnitudes y selecciona sus unidades (M, mM, µM, nM para concentración; cm o mm para longitud).
3Ajusta el número de decimales para obtener el resultado matemático formateado según la relación lineal de Beer-Lambert.

Casos de uso

Cuantificación de cofactores como NADH/NADPH a 340 nm en ensayos cinéticos de actividad enzimática.
Determinación precisa de concentraciones de ácidos nucleicos, proteínas purificadas y colorantes sintéticos.
Cálculo de la absortividad molar de nuevos complejos químicos sintetizados en el laboratorio.

Ejemplos

1. Verificación de absorbancia teórica de NADH a 340 nm

Bioquímico analítico

Contexto

Se prepara una disolución estándar de 100 µM de NADH para contrastar el rendimiento de un espectrofotómetro UV-Vis antes de un ensayo enzimático.

Problema

Calcular la absorbancia teórica esperada en una cubeta de cuarzo de 1 cm.

Cómo usarlo

Seleccionar 'Absorbancia (A)' en 'Calcular', definir ε = 6220 M⁻¹cm⁻¹, concentración = 100 µM y camino óptico = 1 cm.

{"solveFor":"absorbance","extinctionCoeff":6220,"concentration":100,"concUnit":"uM","pathLength":1,"lengthUnit":"cm","decimalPlaces":4}

Resultado

Se obtiene una absorbancia teórica calculada de 0,6220.

2. Determinación del coeficiente de extinción de un cromóforo

Químico de síntesis

Contexto

Se sintetiza un nuevo colorante orgánico y se prepara una solución 50 µM, obteniendo una lectura de absorbancia de 1,200 en cubeta estándar de 1 cm.

Problema

Calcular la absortividad molar ε del compuesto para incluirla en la caracterización analítica.

Cómo usarlo

Preguntas frecuentes

¿En qué unidades se expresa el coeficiente de extinción molar (ε)?

Se expresa en M⁻¹cm⁻¹ (equivalente a L·mol⁻¹·cm⁻¹), reflejando la capacidad de absorción de luz a una longitud de onda específica.

¿Cómo maneja la herramienta las distintas unidades de concentración?

Convierte automáticamente valores en nM, µM o mM a molaridad (M) para realizar el cálculo conforme a la definición estándar de ε.

¿Se pueden utilizar cubetas de paso óptico reducido como 2 mm o 5 mm?

Sí, puedes introducir el valor exacto en milímetros seleccionando 'mm' en la unidad de longitud de camino óptico.

¿La ley de Beer-Lambert es aplicable a cualquier nivel de absorbancia?

Es válida principalmente en el rango lineal del espectrofotómetro, generalmente entre 0,1 y 1,5 unidades de absorbancia.

¿Cuál es el valor estándar de referencia para NADH a 340 nm?

{"solveFor":"extinctionCoefficient","absorbance":1.2,"concentration":50,"concUnit":"uM","pathLength":1,"lengthUnit":"cm","decimalPlaces":2}

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Ejemplos

1. Verificación de absorbancia teórica de NADH a 340 nm

2. Determinación del coeficiente de extinción de un cromóforo

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Ejemplos de Procesamiento de Imágenes Web Python

Muestras FLAC Sin Derechos de Autor

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Ejemplos de Procesamiento de Imágenes Android Java

Conversor Absorbancia↔Transmitancia (A = −log₁₀T)

Conversor de unidades de actividad enzimática (U ↔ katal)

Calculadora de densidad celular OD600 (E. coli)

Calculadora de afinidad proteína-ADN (estimación de Kd)

Cuantificación por absorbancia y cálculos ácido-base