1. 总活力与蛋白质量计算比活力
蛋白纯化实验人员背景
某纯化组分测得总活力为 40 U,总蛋白质量为 5 mg,需要填写纯化表中的比活力。
问题
将总活力和蛋白质量转换为 U/mg,并查看对应的 SI 单位换算值。
如何使用
选择“总活力 + 蛋白质量”,输入活力 40 U、蛋白质量 5 mg,小数位数设为 2。
计算模式:总活力 + 蛋白质量;酶活力:40 U;蛋白质量:5 mg;小数位数:2。结果
比活力为 8 U/mg,换算结果为 133.33 nkat/mg。
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计算酶比活力 = 活力(U) ÷ 蛋白质量(mg),或直接用活力浓度(U/mL) ÷ 蛋白浓度(mg/mL)。输出 U/mg、nkat/mg 与 µkat/mg。比活力是纯度指标:纯化过程中随之上升,纯酶上限 = kcat(min⁻¹) ÷ MW(kDa)(如 kcat 600 min⁻¹、60 kDa → 最高 10 U/mg),实测与理论值之比即纯度估计。要求活力与蛋白测定(Bradford/BCA/A280)均在线性范围内。来源:IUBMB 命名、Scopes《Protein Purification》、Lehninger。仅供教学与实验规划。
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案例
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工具使用指南
酶比活力计算器根据总活力与蛋白质量,或活力浓度与蛋白浓度,计算比活力(U/mg),并换算为 nkat/mg 与 µkat/mg,适合整理纯化表和实验规划。
背景
某纯化组分测得总活力为 40 U,总蛋白质量为 5 mg,需要填写纯化表中的比活力。
问题
将总活力和蛋白质量转换为 U/mg,并查看对应的 SI 单位换算值。
如何使用
选择“总活力 + 蛋白质量”,输入活力 40 U、蛋白质量 5 mg,小数位数设为 2。
计算模式:总活力 + 蛋白质量;酶活力:40 U;蛋白质量:5 mg;小数位数:2。结果
比活力为 8 U/mg,换算结果为 133.33 nkat/mg。
背景
样品活力测定结果为 250 U/mL,Bradford 蛋白测定结果为 10 mg/mL。
问题
不通过移液体积换算,直接根据两项浓度数据得到比活力。
如何使用
选择“活力 + 蛋白浓度”,输入活力浓度 250 U/mL、蛋白浓度 10 mg/mL,小数位数设为 2。
计算模式:活力 + 蛋白浓度;活力浓度:250 U/mL;蛋白浓度:10 mg/mL;小数位数:2。结果
比活力为 25 U/mg,换算结果为 416.67 nkat/mg。
总量模式为比活力 = 活力(U)÷ 蛋白质量(mg);浓度模式为 U/mL ÷ mg/mL。
如果总量和浓度来自同一样品,两种模式的比值相同。
结果包括 U/mg、nkat/mg 和 µkat/mg。
可使用在线性范围内的 Bradford、BCA 或 A280 测定结果。
比活力是纯度指标之一;比较时还应确认活力和蛋白测定均在线性范围内。