1. 预测特定底物浓度下的反应速率
生物化学系研究生背景
正在设计一项酶促反应实验,已知该酶的 Vmax 为 1.5 mol/L·s,Km 为 0.5 mol/L。
问题
需要预测在底物浓度为 0.5 mol/L 且无抑制剂存在时的反应速率。
如何使用
选择“求反应速率 v”模式,输入 Vmax = 1.5,Km = 0.5,底物浓度 = 0.5,抑制类型选择“无”,保留 4 位小数。
结果
计算得出反应速率 v = 0.75 mol/L·s,恰好为最大反应速率 Vmax 的 50%。
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使用米氏方程 v = Vmax·[S]/(Km+[S]) 计算反应速率,或由 (S, v) 实验数据通过 Lineweaver-Burk 双倒数法估算 Km 和 Vmax,并模拟竞争性/非竞争性抑制。
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工具使用指南
酶动力学计算器是一款专为生物化学研究与教学设计的在线工具。它支持使用经典的米氏方程计算特定底物浓度下的酶促反应速率,同时能够通过 Lineweaver-Burk 双倒数法拟合实验数据以快速估算米氏常数(Km)和最大反应速率(Vmax),并支持模拟竞争性、非竞争性和反竞争性抑制剂对反应动力学的影响。
背景
正在设计一项酶促反应实验,已知该酶的 Vmax 为 1.5 mol/L·s,Km 为 0.5 mol/L。
问题
需要预测在底物浓度为 0.5 mol/L 且无抑制剂存在时的反应速率。
如何使用
选择“求反应速率 v”模式,输入 Vmax = 1.5,Km = 0.5,底物浓度 = 0.5,抑制类型选择“无”,保留 4 位小数。
结果
计算得出反应速率 v = 0.75 mol/L·s,恰好为最大反应速率 Vmax 的 50%。
背景
测定了一组新型水解酶在不同底物浓度下的初始反应速率,获得了 5 组实验数据。
问题
需要通过 Lineweaver-Burk 双倒数法拟合这组数据,求出该酶的 Km 和 Vmax。
如何使用
选择“由数据求 Km 和 Vmax”模式,在数据对输入框中输入: 0.1,0.2 0.2,0.33 0.5,0.6 1,0.8 2,1.0
结果
系统通过线性回归拟合,输出估算出的米氏常数 Km 和最大速率 Vmax。
背景
正在测试一种竞争性抑制剂对某激酶的作用,已知酶的 Vmax = 2.0,Km = 0.3,抑制剂浓度 [I] = 0.1,抑制常数 Ki = 0.05。
Km 是反应速率达到最大反应速率(Vmax)一半时的底物浓度,反映了酶与底物的亲和力。
它通过将米氏方程线性化为 1/v 对 1/[S] 的关系,利用最小二乘法拟合直线,从而从截距和斜率中求出 Km 和 Vmax。
竞争性抑制会使表观 Km 增大而 Vmax 不变;非竞争性抑制会同时降低表观 Km 和 Vmax;反竞争性抑制仅降低 Vmax。
每行输入一组数据,格式为“底物浓度,反应速率”(例如 0.1,0.2),数据对之间用换行或空格分隔,且数值必须大于 0。
因为 Lineweaver-Burk 拟合基于线性回归,至少需要两个不同的坐标点才能确定一条直线并计算斜率与截距。
问题
需要计算在底物浓度为 0.3 时,加入该竞争性抑制剂后的表观反应速率。
如何使用
选择“求反应速率 v”模式,输入 Vmax = 2.0,Km = 0.3,底物浓度 = 0.3,抑制类型选择“竞争性”,输入抑制剂浓度 = 0.1,Ki = 0.05。
结果
计算出表观 Km 增大,并输出受抑制后的实际反应速率 v。