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Berechnet die spezifische Aktivität = Aktivität(U) ÷ Proteinmasse(mg) oder direkt Aktivitätskonzentration(U/mL) ÷ Proteinkonzentration(mg/mL). Gibt U/mg, nkat/mg und µkat/mg aus. Sie ist eine Reinheitsmetrik: Sie steigt bei der Aufreinigung und erreicht maximal kcat(min⁻¹) ÷ MW(kDa) für das reine Enzym (z. B. kcat 600 min⁻¹ und 60 kDa → 10 U/mg); das Verhältnis gemessen/theoretisch schätzt die Reinheit. Aktivitäts- und Proteinbestimmung (Bradford/BCA/A280) müssen linear sein. Quellen: IUBMB-Nomenklatur, Scopes Protein Purification, Lehninger. Nur für Ausbildung.
Ausführung
Fülle das Formular aus, starte das Tool und prüfe das Ergebnis an einem Ort.
Beispiele
Verwandt
Leitfaden zur Tool-Nutzung
Der Rechner bestimmt die spezifische Enzymaktivität aus Gesamtaktivität und Proteinmasse oder aus Aktivitäts- und Proteinkonzentration. Das Ergebnis wird in U/mg, nkat/mg und µkat/mg ausgegeben und kann als Reinheitsmetrik in einer Proteinaufreinigung dienen.
Hintergrund
Eine Fraktion enthält 40 U Gesamtaktivität und 5 mg Gesamtprotein.
Aufgabe
Die spezifische Aktivität soll als Kennzahl für eine Aufreinigungstabelle bestimmt werden.
Verwendung
Wähle „Gesamtaktivität + Proteinmasse“ und gib 40 U sowie 5 mg ein.
Aktivität: 40 U; Proteinmasse: 5 mg; Dezimalstellen: 2Ergebnis
Das Ergebnis beträgt 8 U/mg, entsprechend 133,33 nkat/mg.
Hintergrund
Ein Aktivitätstest ergibt 250 U/mL, während die Proteinkonzentration 10 mg/mL beträgt.
Aufgabe
Die spezifische Aktivität soll ohne separate Volumenberechnung ermittelt werden.
Verwendung
Wähle „Aktivität + Proteinkonzentration“ und trage 250 U/mL sowie 10 mg/mL ein.
Aktivität: 250 U/mL; Proteinkonzentration: 10 mg/mL; Dezimalstellen: 2Spezifische Aktivität = Aktivität in U ÷ Proteinmasse in mg. Bei Konzentrationswerten gilt: U/mL ÷ mg/mL.
Verwende den Massenmodus für Gesamtaktivität und Proteinmasse, den Konzentrationsmodus für U/mL und mg/mL.
Das Ergebnis wird in U/mg, nkat/mg und µkat/mg ausgegeben.
Eine höhere spezifische Aktivität weist innerhalb einer Aufreinigung meist auf eine stärkere Anreicherung des aktiven Enzyms hin.
Aktivitätsmessung und Proteinbestimmung, etwa mit Bradford, BCA oder A280, sollten im linearen Messbereich liegen.
Ergebnis
Die spezifische Aktivität beträgt 25 U/mg, entsprechend 416,67 nkat/mg.