Henderson-Hasselbalch-Pufferrezept & Konzentrationstabelle

Henderson-Hasselbalch-Pufferrezept & Konzentrationstabelle | Kostenloses Online-Tool | Elysia Tools

Leitfaden zur Tool-Nutzung

Erfahren Sie, wann dieses Tool passt, was es unterstützt und wie Nutzer es anwenden.

Wichtige Fakten

Kategorie: Health
Eingabetypen: select, number
Ausgabetyp: html
Sample-Abdeckung: 4
API bereit: Ja

Überblick

Der Henderson-Hasselbalch-Pufferrechner berechnet präzise Säure- und Salzanteile für acht gängige Bench-Puffersysteme unter Berücksichtigung von Ziel-pH, Pufferkonzentration, Arbeitsvolumen und Temperatur. Sie erhalten sofort ein abwägbares Rezept inklusive temperaturkorrigiertem pKa-Wert, Pufferkapazität und Ionenstärke.

Wann verwenden

Wenn Sie Standardpuffer wie Phosphat-, Tris- oder HEPES-Puffer mit exaktem Ziel-pH für Laborversuche ansetzen.
Wenn Versuche bei abweichenden Temperaturen wie 4 °C (Kühlraum) oder 37 °C stattfinden und die pKa-Verschiebung kompensiert werden muss.
Wenn für biochemische oder biophysikalische Assays die exakte Ionenstärke und Pufferkapazität dokumentiert werden müssen.

So funktioniert es

1Wählen Sie das gewünschte Puffersystem (z. B. Phosphat, Tris, HEPES) aus und geben Sie Ziel-pH, Gesamtkonzentration, Endvolumen sowie die geplante Arbeitstemperatur ein.
2Das Tool berechnet den temperaturkorrigierten pKa-Wert anhand des systemspezifischen Temperaturkoeffizienten.
3Über die Henderson-Hasselbalch-Gleichung wird das Säure-Base-Verhältnis ermittelt und in die erforderlichen Stoffmengen und Einwaagen (in Gramm) umgerechnet.
4Zusätzlich werden Pufferkapazität (β) und die resultierende Ionenstärke der Pufferlösung ausgegeben.

Anwendungsfälle

Herstellung von Phosphatpuffern (PBS-Basis) für zellbiologische Wasch- und Inkubationsschritte.
Präparation temperaturstabiler Tris-HCl-Lauf- und Elutionspuffer für die Proteinchromatographie bei 4 °C.
Planung von enzymatischen Reaktionspuffern mit MES oder HEPES unter definierter Ionenstärke.

Beispiele

1. 1 L Phosphatpuffer (100 mM, pH 7,4 bei 25 °C)

Laborant in der Assay-Entwicklung

Hintergrund

Für einen enzymatischen Standardassay wird 1 Liter 100 mM Natriumphosphatpuffer mit pH 7,4 bei Raumtemperatur benötigt.

Aufgabe

Berechnung der genauen Einwaagen von NaH₂PO₄·H₂O und Na₂HPO₄·2H₂O ohne zeitaufwendige manuelle Titration.

Verwendung

Wählen Sie 'Phosphat', setzen Sie den Ziel-pH auf 7.4, die Konzentration auf 100 mM, das Volumen auf 1000 mL und die Temperatur auf 25 °C.

Puffersystem: phosphate, Ziel-pH: 7.4, Konzentration: 100 mM, Volumen: 1000 mL, Temperatur: 25 °C

Ergebnis

Ergibt 8,41 g NaH₂PO₄·H₂O und 10,81 g Na₂HPO₄·2H₂O mit einem korrigierten pKa von 7,21 und einer Ionenstärke von ca. 0,22 M.

2. Tris-HCl-Puffer für die Proteinaufreinigung bei 4 °C

Biochemie-Doktorandin

Hintergrund

Eine Proteinchromatographie muss im Kühlraum bei 4 °C mit 500 mM Tris-Puffer bei pH 8,0 durchgeführt werden.

Aufgabe

Tris weist eine starke Temperaturdrift auf; ein bei Raumtemperatur eingestellter pH 8,0 verschiebt sich bei 4 °C deutlich in den basischen Bereich.

FAQ

Welche Puffersysteme werden unterstützt?

Unterstützt werden Acetat, Citrat, MES, Phosphat (Sørensen), MOPS, HEPES, Tris und Bicarbonat/Carbonat.

Warum ist die Arbeitstemperatur wichtig?

Der pKa-Wert vieler Puffer (insbesondere Tris) ändert sich mit der Temperatur; die Korrektur stellt den korrekten pH-Wert bei Versuchstemperatur sicher.

In welchem pH-Bereich ist ein Puffer wirksam?

Ein Puffersystem besitzt seine höchste Pufferkapazität im Bereich von pKa ± 1 pH-Einheit.

Berechnet das Tool direkt die Einwaagen in Gramm?

Ja, basierend auf dem gewählten Volumen und der molaren Masse der Komponenten werden direkt abwägbare Massen ausgegeben.

Berücksichtigt das Tool zusätzliche Salze für die Ionenstärke?

Die Ionenstärke wird auf Basis der deprotonierten und protonierten Pufferkomponenten des reinen Systems berechnet.

Puffersystem: tris, Ziel-pH: 8.0, Konzentration: 500 mM, Volumen: 500 mL, Temperatur: 4 °C

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1. 1 L Phosphatpuffer (100 mM, pH 7,4 bei 25 °C)

2. Tris-HCl-Puffer für die Proteinaufreinigung bei 4 °C

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