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Calculadora de eficiência de transfecção (taxa GFP+)
Calcula a eficiência de transfecção pela taxa GFP+: eficiência = células GFP+ ÷ total × 100. O modo de medição única acrescenta intervalo de confiança Wilson de 95% (mais confiável que a aproximação normal em contagens pequenas); o modo de réplicas recebe contagens paralelas separadas por vírgula e devolve eficiência por poço, média e desvio padrão amostral (n−1). Faixas de interpretação: ≥70% excelente (linhas fáceis HEK293/CHO), 30–70% bom, 10–30% moderado, <10% baixo (considerar eletroporação ou vetores virais). Premissas: mesmo limiar de GFP, excluir células mortas, leitura no pico de 24–72 h. Fontes: Wilson 1927, Newcombe 1998, Kim & Eberwine 2010. Apenas para educação.
Execução
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Exemplos
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Guia de uso da ferramenta
Veja quando usar esta ferramenta, o que ela suporta e como os usuários a aplicam.
Fatos principais
Categoria
Education
Tipos de entrada
select, number, text
Tipo de saída
json
Cobertura de exemplos
4
API pronta
Sim
Visão geral
A calculadora de eficiência de transfecção determina a taxa de células GFP-positivas em relação ao total contado. No modo de medição única, também calcula o intervalo de confiança Wilson de 95%; no modo de réplicas, apresenta a eficiência de cada réplica, a média e o desvio padrão amostral.
Quando usar
Para calcular a porcentagem de células GFP-positivas após uma transfecção.
Para estimar a incerteza de uma contagem única usando o intervalo de confiança Wilson de 95%.
Para comparar poços ou campos replicados por meio da média e do desvio padrão.
Como funciona
1Selecione medição única ou poços e campos replicados.
2No modo único, informe o total de células viáveis e o número de células GFP-positivas.
3No modo de réplicas, informe as contagens totais e GFP-positivas na mesma ordem, separadas por vírgulas.
4A ferramenta calcula a eficiência como GFP+ ÷ total × 100 e arredonda o resultado conforme o número de casas decimais escolhido.
Casos de uso
Analisar contagens de GFP obtidas por citometria de fluxo.
Resumir campos de microscopia de fluorescência em réplicas.
Apoiar a comparação inicial de condições de transfecção em células mamíferas.
Exemplos
1. Medição única por citometria: 30% de eficiência
Pesquisador de biologia molecular
Contexto
Uma amostra de transfecção foi analisada por citometria de fluxo, com 500 células viáveis contadas e 150 eventos GFP-positivos.
Problema
Calcular a taxa GFP+ e verificar a faixa de interpretação do resultado.
Como usar
Selecione “Medição única”, informe 500 no total de células e 150 em células GFP-positivas.
Casas decimais: 2.
Resultado
A eficiência calculada é de 30%, com intervalo de confiança Wilson de 95% entre aproximadamente 26,15% e 34,16%. O resultado fica na faixa considerada boa.
2. Três campos de microscopia: média de 27,04%
Técnico de laboratório
Contexto
Três campos de fluorescência foram contados manualmente: 120 GFP+ de 480 células, 155 de 510 e 130 de 505.
Problema
Obter a eficiência de cada campo e resumir a variação entre as réplicas.
Como usar
Selecione “Poços ou campos replicados”. Insira “480, 510, 505” nos totais e “120, 155, 130” nos GFP-positivos.
Perguntas frequentes
Como a eficiência de transfecção é calculada?
A eficiência é calculada dividindo o número de células GFP-positivas pelo total de células contadas e multiplicando por 100.
O que o modo de medição única informa?
Ele informa a eficiência percentual, a contagem usada e o intervalo de confiança Wilson de 95%.
Como inserir as réplicas?
Digite os totais e os GFP-positivos separados por vírgulas, mantendo a mesma ordem nas duas listas.
O que significa o desvio padrão no modo de réplicas?
Ele mostra a variação entre as eficiências das réplicas e é calculado como desvio padrão amostral, com n−1.
A calculadora substitui uma análise experimental?
Não. Ela é uma ferramenta educacional e depende de contagens consistentes, do mesmo limiar de GFP e da exclusão de células mortas.