Comment calculer la viabilité cellulaire au bleu de trypan ?

Divisez le nombre de cellules vivantes par le nombre total de cellules, puis multipliez par 100.

Que signifie le facteur de dilution ?

Il correspond au rapport entre le volume total du mélange et le volume de l’échantillon. Pour un mélange 1:1 avec le bleu de trypan, le facteur est 2.

Pourquoi compter les cellules dans plusieurs carrés ?

Le nombre de carrés comptés permet de rapporter le comptage à une concentration moyenne par mL.

Comment interpréter le résultat de viabilité ?

Une viabilité d’au moins 90 % est considérée comme saine, de 70 à 90 % comme acceptable, et inférieure à 70 % comme stressée.

Quand faut-il compter après l’ajout du bleu de trypan ?

Le comptage doit être effectué dans les 3 à 5 minutes, car une exposition prolongée peut colorer ou endommager des cellules viables.

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Calculateur de viabilité cellulaire au bleu de trypan

Calcule la viabilité à partir des comptages cellules vivantes/mortes du test d'exclusion au bleu de trypan : viabilité % = vivantes ÷ (vivantes + mortes) × 100 ; concentration en vivantes = comptage × dilution × 10⁴ ÷ carrés. Le colorant ne traverse pas les membranes intactes : les cellules vivantes restent claires, les lésées se colorent en bleu profond. Fournit une lecture de l'état de la culture (≥90% saine, 70–90% acceptable, <70% stressée) et des conseils de protocole (compter en 3–5 min ; une exposition prolongée tue les cellules viables). Sources : Freshney, protocole de Strober. Uniquement à but éducatif.

Exécution

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2 exemples

180 vivantes + 20 mortes dans 4 carrés, coloration 1:1 → viabilité 90%

Un mélange 1:1 au bleu de trypan (dilution 2) compté sur 4 grands carrés donne 180 cellules claires et 20 bleues. La viabilité est 180 ÷ 200 = 90%, avec 9×10⁵ cellules vivantes/mL et 1×10⁶ au total/mL — une culture saine prête à être passée.

{"result":"Viability ≈ 90% (180 live / 20 dead); live ≈ 900,000 cells/mL, total ≈ 1,000,000 cells/mL. Culture looks healthy.","metadata":{"result":{"viabilityPercent":90,"livePerMl":900000,"totalPerMl":1000000,"healthStatus":"healthy"}}}

55 vivantes + 45 mortes → viabilité 55%, culture stressée

Un flacon surconfluent compté pur (dilution 1, un seul carré) montre 55 cellules claires contre 45 bleues. La viabilité de 55% tombe dans la bande de stress et l'outil invite à vérifier surconfluence, dissociation trop brutale et mycoplasmes avant toute expérience.

{"result":"Viability ≈ 55% (55 live / 45 dead); live ≈ 550,000 cells/mL, dead ≈ 450,000 cells/mL. Culture is stressed.","metadata":{"result":{"viabilityPercent":55,"livePerMl":550000,"healthStatus":"stressed"}}}

Entrées

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5 réglages

RéglagesAjustez formats, plages, nombres et modes.5

Cellules vivantes (non colorées)numberRequisBright, dye-excluding cells counted.Cellules mortes (bleues)numberRequisDeep-blue, dye-permeable cells counted.Facteur de dilutionnumberRequisTotal-to-sample volume ratio of the dye mix (1:1 with trypan blue ⇒ 2).Carrés comptésnumberRequisNumber of 1 mm² large squares the counts cover.DécimalesnumberOptionnel

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Cas d’usage

Exemples

1. Culture saine après un comptage sur quatre carrés

2. Culture stressée avec une forte proportion de cellules mortes

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