# 蛋白质消光系数计算器（ε280）

按 Pace 1995 / Gill & von Hippel 1989 公式计算 ε280 = 5500×nTrp + 1490×nTyr + 125×n胱氨酸（M⁻¹cm⁻¹，典型误差 ±5%）。胱氨酸为二硫键配对的 Cys，仅氧化态计入（⌊Cys/2⌋，落单不计），工具同时给出全还原与全氧化两个值以便夹逼实际氧化态。序列模式自动计数 W/Y/C 并用 ProtParam 平均残基质量算分子量；计数模式直接输入残基数目与可选分子量。附带 A0.1% = ε/MW（1 mg/mL 的吸光度），即由 A280 反推浓度 c = A/ε。注意：不含 Trp/Tyr 的蛋白 ε280 近乎为零（改用 A205 或 BCA）；需扣除核酸污染（A260）。来源：Pace 1995、Gill & von Hippel 1989、ExPASy ProtParam。仅供教学与实验规划。

> 标准页面: https://elysiatools.com/zh/tools/protein-extinction-coefficient

- **分类:** Education

- **关键词:** 蛋白质消光系数计算器, ε280 蛋白, A280 浓度计算, Trp Tyr 胱氨酸 吸光, Pace 1995 消光系数, Gill von Hippel 消光, ProtParam 消光系数, 摩尔吸光系数 蛋白, A0.1% 1 mg/ml 吸光度, 分子生物学, 实验计算器

## 概述

蛋白质消光系数计算器（ε280）根据蛋白质序列或 Trp、Tyr、Cys 残基数，按 Pace 1995 与 Gill & von Hippel 公式计算摩尔消光系数，并同时给出全还原、全氧化范围、分子量和 A0.1% 等结果，适用于教学与实验规划。

## 输入项

- **输入模式** (select): Count W/Y/C from a sequence, or enter residue counts directly.
- **蛋白质序列（单字母编码）** (textarea): One-letter codes, 20 standard residues (FASTA headers, whitespace, and '*' are stripped); sequence mode.
- **色氨酸（Trp）数目** (number): Number of tryptophans (counts mode); each contributes 5500 M⁻¹cm⁻¹.
- **酪氨酸（Tyr）数目** (number): Number of tyrosines (counts mode); each contributes 1490 M⁻¹cm⁻¹.
- **半胱氨酸（Cys）数目** (number): Number of cysteines (counts mode); each disulfide pair contributes 125 M⁻¹cm⁻¹ when oxidized.
- **半胱氨酸状态** (select): Reduced cysteines contribute nothing; oxidized pairs (cystines) add 125 each.
- **分子量（kDa，计数模式）** (number): Protein molecular weight for the A0.1% conversion in counts mode; 0 skips it.
- **小数位数** (number)

## 适用场景

- 根据蛋白质序列快速统计 Trp、Tyr 和 Cys 数目并估算 ε280。
- 已知残基计数和分子量时，直接计算全还原或全氧化状态下的消光系数。
- 使用 A280 测定蛋白浓度前，获得 ε280 或判断该方法是否适用。

## 工作原理

- 选择“蛋白质序列”或“残基数目”输入模式。
- 序列模式会自动统计 W、Y、C，并按 ProtParam 平均残基质量估算分子量；计数模式直接使用输入的残基数。
- 工具按 ε280 = 5500×nTrp + 1490×nTyr + 125×n胱氨酸计算，其中胱氨酸按 ⌊Cys/2⌋ 计入。
- 结果包含当前半胱氨酸状态下的 ε280、另一种氧化状态的范围值，以及可用分子量计算的 A0.1%。

## 使用案例

- 重组蛋白纯化后，根据序列估算 A280 浓度测定所需的 ε280。
- 研究含二硫键蛋白时，比较全还原与全氧化状态下的吸光差异。
- 教学或实验设计中，使用残基计数模式验证 Pace 公式和 A0.1% 换算。

## 常见问题

### 蛋白质序列需要使用什么格式？

请输入标准单字母氨基酸编码。FASTA 标题、空格、换行和星号会被去除。

### 胱氨酸如何参与计算？

只有形成二硫键的 Cys 对计入，每个胱氨酸贡献 125 M⁻¹cm⁻¹；落单的 Cys 不计入。

### 全还原和全氧化有什么区别？

全还原时 Cys 不贡献 ε280；全氧化时按 Cys 数量的一半估算胱氨酸贡献，用于限定实际氧化态范围。

### A0.1% 代表什么？

A0.1% 是 1 mg/mL 蛋白溶液在 1 cm 光程下的理论吸光度，按 ε/MW 计算。

### 所有蛋白都适合用 A280 测浓度吗？

不适合。不含 Trp/Tyr 的蛋白 ε280 近乎为零，可考虑 A205 或 BCA，并注意校正核酸污染造成的 A260 影响。

## 相关工具

- [PCR 退火温度计算器（Ta = Tm − 5°C）](https://elysiatools.com/zh/tools/annealing-temperature-calculator): 计算 PCR 退火温度 Ta，支持两条规则：实验台默认的简单规则 Ta = Tm − 5°C（取引物对中较低的 Tm），与 Rychlik 1990 经验公式 Ta = 0.3×Tm(引物) + 0.7×Tm(产物) − 14.9（产物 Tm 通常 75–90°C，对典型引物对比简单规则高 1–8°C）。输出推荐 Ta、±3°C 梯度范围以及调温方向指引：温度过低出现非特异带与引物二聚体，过高则无扩增；两条引物 Tm 差应控制在 2–3°C 内并按较低者退火。来源：Rychlik 1990、Innis & Gelfand 1990、Lorenz 2012。仅供实验规划。
- [常染色体显性遗传系谱分析器](https://elysiatools.com/zh/tools/autosomal-dominant-pedigree): 计算常染色体显性（AD）遗传的子代风险并评估观察数据与预期比例的拟合度。亲本基因型组合决定预期患病比例：AA × 任意 = 全部患病；Aa × Aa = 3:1（75%）；Aa × aa = 1:1（50%）；aa × aa = 无。观察计数可做卡方检验（df = 1，α = 0.05 临界值 3.841）。系谱特征清单：垂直传递（代代出现）、两性患病率相近、父传子存在（可排除 X 连锁显性）、未患病者一般不传递（除新发突变）。示例疾病：亨廷顿病、软骨发育不全、马凡综合征。来源：Griffiths、Hartl & Clark 2007、StatPearls、OMIM。仅供教学用途。
- [常染色体隐性遗传风险计算器](https://elysiatools.com/zh/tools/autosomal-recessive-risk): 计算常染色体隐性遗传病在每个孩子及 n 个孩子中的患病概率。患病孩子（aa）必须从父母双方各得一个隐性等位基因：P(子代患病) = P(亲本1传 a) × P(亲本2传 a)。支持亲本状态：携带者（Aa）、患者（aa）、非携带者（AA）、未知（由群体携带率 c 推断：P(Aa)=c、P(aa)=c²）。双携带者 → 每胎 25% 患病、50% 携带、未患病子女为携带者的概率 2/3；n 个孩子至少一个患病 = 1 − (1−r)^n。默认携带率 0.04（北欧裔囊性纤维化 1/25）。来源：Griffiths、Hartl & Clark 2007、StatPearls。仅供教学用途，不能替代遗传咨询。
- [血球计数板细胞计数计算器](https://elysiatools.com/zh/tools/cell-counting-hemocytometer): 把血球计数板（改良 Neubauer）的原始计数换算为细胞浓度：cells/mL =（计数总数 ÷ 大方格数）× 稀释倍数 × 10⁴（每个 1 mm² 大方格在 0.1 mm 深度下容积恰为 0.1 µL）。输入计数总数、方格数（通常 4 个角格或加中央共 5 格）与稀释倍数，可选填样品体积以得到总细胞数；并按每格 20–100 个细胞的理想密度给出操作建议。来源：Freshney 细胞培养手册、Neubauer 改良室几何规格。仅供教学与实验规划。
- [细胞倍增时间计算器](https://elysiatools.com/zh/tools/cell-doubling-time): 由两次细胞计数计算指数生长期动力学：倍增时间 t_d = ln2 × t ÷ ln(Nₜ/N₀)，同时给出倍增次数 n = ln(Nₜ/N₀) ÷ ln2 与比生长速率 μ = ln(Nₜ/N₀)/t（h⁻¹）。N₀/Nₜ 可为细胞数或任意一致单位的密度，时间支持小时/天/分钟。前提是两点都处于对数期（接种低于汇合、收获早于接触抑制），否则 t_d 会偏高；并附 HEK293/HeLa/CHO 常见倍增时间参照。来源：Freshney 细胞培养手册。仅供教学与实验规划。
- [台盼蓝细胞活力计算器](https://elysiatools.com/zh/tools/cell-viability-trypan-blue): 由台盼蓝拒染试验的活/死细胞计数计算活力：活力 % = 活 ÷（活 + 死）× 100；活细胞浓度 = 活细胞计数 × 稀释倍数 × 10⁴ ÷ 大方格数。台盼蓝不能透过完整细胞膜，活细胞明亮未着色、膜受损细胞染成深蓝。结果附培养状态判读（≥90% 健康、70–90% 可接受、<70% 受损）与操作要点（染色后 3–5 分钟内计数，暴露过久会杀死活细胞）。来源：Freshney《Culture of Animal Cells》、Strober 拒染试验方案。仅供教学与实验规划。
- [CFU/mL 菌落形成单位计算器](https://elysiatools.com/zh/tools/cfu-calculator): 把平板菌落计数换算为原始培养物浓度：CFU/mL = 菌落数 × 10ⁿ ÷ 接种体积（mL），其中平皿接种自 10⁻ⁿ 稀释管。内置标准可计数范围 30–300 个/皿的判读：>300 提示 TNTC（过多无法计数，需加大稀释度），<30 提示 TFTC（过少误差大，需降低稀释度），0 个菌落给出检测限 LOD；可选填原始样品体积换算总 CFU。来源：Standard Methods 平板计数法、FDA BAM。仅供教学与实验规划。
- [DNA 拷贝数计算器（浓度 → 拷贝数）](https://elysiatools.com/zh/tools/dna-copy-number-calculator): 把 DNA 质量浓度换算成每微升分子拷贝数：copies/µL = 浓度(g/µL) × 阿伏伽德罗常数 ÷ (长度bp × 660 g/mol)。支持 ng/µL（NanoDrop 常用，与 µg/mL 等值）、pg/µL（Qubit 量程）与 µg/µL；附 pmol/µL 摩尔量换算与可选体积的总拷贝数。参考值：5000 bp 质粒 50 ng/µL → 9.12×10⁹ 拷贝/µL（0.0152 pmol/µL）。提醒：660 Da/bp 为平均值，对质粒/基因组/扩增片段足够精确，精确寡核苷酸请逐碱基求和；A260 会因 RNA/游离核苷酸污染而高估，准确定量建议用荧光染料法。来源：SI 2019 阿伏伽德罗常数、Thermo Fisher 惯例、Sambrook & Russell。仅供实验规划。

## 示例

- [Web Python 图像处理示例](https://elysiatools.com/zh/samples/web-image-processing-python): Web Python 图像处理示例，使用 PIL/Pillow 包括读取、保存、缩放和格式转换
- [Android Java 图像处理示例](https://elysiatools.com/zh/samples/android-image-processing-java): Android Java 图像处理示例，包括图像读取保存、缩放和格式转换
- [Android Kotlin 图像处理示例](https://elysiatools.com/zh/samples/android-image-processing-kotlin): Android Kotlin 图像处理示例，包括图像读取保存、缩放和格式转换
- [Web Rust 图像处理示例](https://elysiatools.com/zh/samples/web-image-processing-rust): Web Rust 图像处理示例，包括图像读取保存、缩放和格式转换

## 相关内容

- [蛋白定量、酶动力学与序列分析工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/protein-quantification-enzyme-kinetics-sequence-tools): 在一个实验室工作流中完成蛋白测定、浓度换算、序列分析，以及酶活性、动力学、抑制和结合测量解读。
- [音频编码与格式转换工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/audio-convert): 在一个专题里比较音频格式转换、码率调整、采样率转换、编码切换和导出工具，适合交付与归档工作流。
- [图片格式转换与动画导出工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/image-convert): 在一个专题里比较 JPG、PNG、GIF、AVIF、WebP、TIFF、ICO、base64 以及动画导出相关的图片格式转换工具。
- [JSON 交换与格式翻译工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/json-convert): 在一个专题里比较 JSON 与 CSV、YAML、TOML、GraphQL、XML、Markdown、Excel、BSON、EDN 等结构化格式之间的转换工具。