# Bradford 法蛋白定量计算器（BSA 标准曲线） 按 Bradford 法（考马斯亮蓝 G-250，595 nm）由 BSA 标准曲线定量蛋白：粘贴“浓度(µg/mL), A595”标准曲线数据与待测孔吸光度，工具做最小二乘拟合（给出斜率、截距、R²），反算 c = (A−b)/m，再乘以稀释倍数输出 µg/mL 与 mg/mL。超出标准范围的读数标记为外推；低于空白的读数判为不可定量。要点：染料响应随蛋白不同差异大（BSA 约为 IgG 的两倍），高去垢剂不适；配制标准品须与样品同缓冲液。来源：Bradford 1976 Anal Biochem。仅供教学与实验规划。 > 标准页面: https://elysiatools.com/zh/tools/bradford-assay-calculator - **分类:** Education - **关键词:** bradford 法计算器, 蛋白定量 a595, 考马斯亮蓝测定, bsa 标准曲线, 吸光度求蛋白浓度, 标准曲线 线性回归 蛋白, bradford 蛋白定量协议, 未知样品蛋白浓度, 酶标板蛋白测定, 生物化学计算器, 实验计算器 ## 概述 Bradford 法蛋白定量计算器使用 BSA 标准品的浓度与 A595 数据进行最小二乘线性拟合，计算斜率、截距和 R²，并根据待测吸光度反算蛋白浓度，结合稀释倍数输出 µg/mL 与 mg/mL。 ## 输入项 - **蛋白标准品（µg/mL, A595）** (textarea): One standard per line: concentration in µg/mL, then A595 (comma, semicolon, tab, or space separated). - **待测吸光度（A595）** (textarea): One sample A595 reading per line (blank-subtracted readings are fine as long as the curve includes the blank). - **样品稀释倍数** (number): Dilution applied to the sample before the assay (1 = undiluted). - **小数位数** (number) ## 适用场景 - 已有 BSA 标准曲线数据，需要快速计算未知样品蛋白浓度时。 - 需要同时分析多个待测孔的 A595 吸光度时。 - 需要纳入样品稀释倍数，并检查读数是否超出标准范围时。 ## 工作原理 - 按每行一个标准品输入“浓度（µg/mL）, A595”，分隔符可使用逗号、分号、制表符或空格。 - 输入每个待测样品的 A595 吸光度，并填写样品稀释倍数。 - 工具用最小二乘法拟合 A = mc + b，输出斜率、截距和 R²。 - 根据 c = (A−b)/m 反算浓度，再乘以稀释倍数；超出标准范围会标记为外推，低于空白的读数判为不可定量。 ## 使用案例 - 生物化学教学中练习 BSA 标准曲线、线性回归和未知浓度反算。 - 酶标板 Bradford 测定中批量计算多个样品的蛋白浓度。 - 蛋白提取或裂解液测定中，根据稀释倍数换算原样品浓度。 ## 常见问题 ### 需要输入哪些数据？ 需要输入 BSA 标准品的浓度与 A595，以及待测样品的 A595 吸光度和稀释倍数。 ### 标准品数据应如何填写？ 每行填写一个标准品，格式为“浓度（µg/mL）, A595”，例如“10, 0.200”。 ### 结果会包含哪些内容？ 结果包括拟合斜率、截距、R²，以及各待测样品的 µg/mL 和 mg/mL 浓度。 ### 稀释倍数如何影响结果？ 工具先计算测定体系中的浓度，再乘以输入的稀释倍数，得到原样品浓度。未稀释样品应填写 1。 ### 超出标准曲线范围的读数能否使用？ 工具会将其标记为外推；低于空白的读数则判为不可定量。外推结果应谨慎解释。 ## 相关工具 - [BCA 法蛋白定量计算器（标准曲线）](https://elysiatools.com/zh/tools/bca-assay-calculator): 按 BCA 法（二喹啉甲酸，562 nm）由标准曲线定量蛋白：粘贴“浓度(µg/mL), A562”标准品数据与待测孔吸光度，工具做最小二乘拟合（斜率、截距、R²），反算 c = (A−b)/m，乘以稀释倍数输出 µg/mL 与 mg/mL。超范围读数标记外推；低于空白的读数判不可定量。BCA 要点：兼容约 5% 去垢剂（裂解液首选，优于 Bradford）；但 DTT/TCEP/β-巯基乙醇（>1 mM）与高浓度 EDTA 会还原/螯合 Cu²⁺ 使读数虚高，须先除干扰；工作范围约 20–2000 µg/mL（Micro BCA 0.5–20）。来源：Smith 1985 Anal Biochem。仅供教学与实验规划。 - [DNA 浓度计算器（A260 吸光度法）](https://elysiatools.com/zh/tools/dna-concentration-a260): 用 A260 紫外吸光度法测定 DNA 浓度：浓度 (µg/mL) = A260 × 稀释倍数 × 转换系数 ÷ 光程 (cm)。经验系数：双链 DNA 1 OD = 50 µg/mL，单链 DNA 1 OD = 33 µg/mL（RNA 为 40，见配套 RNA 工具）。1 µg/mL = 1 ng/µL；输入洗脱体积即可得总量 µg。附带 0.1–1.5 线性范围判读：低于 0.1 噪声为主，高于 1.5 探测器可能饱和，需稀释重测。纯度请用 OD260/280 工具判断。来源：Marmur & Doty 1961/1962、Sambrook & Russell、Thermo Fisher NanoDrop 技术资料。仅供教学与实验规划，请以校准仪器为准。 - [OD260/230 纯度比计算器（盐/有机溶剂污染）](https://elysiatools.com/zh/tools/od260-230-ratio): 用 OD260/230 比值判断核酸样品的盐与有机溶剂污染——这是 260/280 检不出污染时的重要补充：纯核酸该比值为 2.0–2.2，低于 2.0 提示胍（TRIzol/柱试剂盒）、酚、碳水化合物、EDTA、高盐或 β-巯基乙醇残留；2.2–2.3 通常为可接受的缓冲液效应；高于 2.3 提示水/缓冲液假象需复测。可选填 A280 同时给出 OD260/280 交叉核对（DNA ~1.8、RNA ~2.0），一次读数覆盖两个纯度维度。读数低于 ~0.05 时比值不可靠。来源：Thermo Fisher T042、Sambrook & Russell、Manchester 1995。仅供教学与实验规划。 - [核酸纯度比计算器（OD260/280）](https://elysiatools.com/zh/tools/od260-280-ratio): 用 OD260/280 比值判断核酸样品纯度：核酸碱基在 260 nm 吸收最强，蛋白质芳香族氨基酸与酚类在 280 nm 附近吸收，因此 A260/A280 可诊断蛋白/酚污染。预期值：纯 DNA ≈ 1.8（可接受 1.7–2.0），纯 RNA ≈ 2.0（可接受 1.8–2.2）；DNA < 1.7 或 RNA < 1.8 提示蛋白/酚/胍污染，DNA > 2.0 提示 RNA 污染，RNA > 2.2 提示低离子强度缓冲液等测量假象。可选填 A230 计算次级比值 A260/A230（纯品 2.0–2.2，偏低提示胍/酚/碳水化合物/盐残留）。读数低于 ~0.05 时比值不可靠。来源：Manchester 1995、Sambrook & Russell、Thermo Fisher T042。仅供教学与实验规划。 - [RNA 浓度计算器（A260，1 OD = 40 µg/mL）](https://elysiatools.com/zh/tools/rna-concentration-a260): 用 A260 紫外吸光度法测定 RNA 浓度：浓度 (µg/mL) = A260 × 稀释倍数 × 40 ÷ 光程 (cm)。RNA 的经验系数为 1 OD = 40 µg/mL，介于双链 DNA（50）与单链 DNA（33）之间；常见操作失误是沿用 dsDNA 的 50，会高估 RNA 产量 25%。1 µg/mL = 1 ng/µL；输入洗脱体积即可得总量 µg。附带 0.1–1.5 线性范围判读；纯 RNA 的 OD260/280 应接近 2.0（DNA 约 1.8），纯度请用配套比值工具判断，操作注意无 RNase、置冰。来源：Marmur & Doty 1961/1962、Sambrook & Russell、Manchester 1995、Thermo Fisher NanoDrop。仅供教学与实验规划，请以校准仪器为准。 - [肺炎严重程度对比判读（CURB-65 / PSI / SMART-COP）](https://elysiatools.com/zh/tools/curb-65-vs-pneumonia-severity): 一次输入同时计算三项肺炎评分并对比判读：CURB-65（0-5，门急诊/住院分流）、PSI/PORT（Class I-V，最精确的死亡风险分层）、SMART-COP（0-10，预测是否需 ICU 呼吸/升压支持）。三项各有侧重：CURB-65 简便快捷；PSI 更精确但更复杂；SMART-COP 识别需 ICU 的患者。输出各评分总分+分级+判读，并分析三者一致性（是否都指向门急诊/住院/ICU）。当三者结论不一致时，倾向于更保守的处置。来源 Lim 2003、Fine 1997、Charles 2008。不构成医疗建议。 - [图片颜色取样器](https://elysiatools.com/zh/tools/image-color-picker): 通过指定坐标从图片中选取颜色。获取 HEX、RGB、HSL、HSV 和 CMYK 格式的颜色值。 - [密码子翻译器（DNA/RNA → 氨基酸）](https://elysiatools.com/zh/tools/codon-amino-acid-translator): 使用标准遗传密码将 DNA 或 mRNA 序列翻译为蛋白质。扫描全部 6 个阅读框（正向与反向互补），标注起始密码子（AUG）与终止密码子，找出最长的开放阅读框（ORF），并按化学类别给氨基酸着色显示组成。支持 T→U 归一化与反向互补链翻译。 ## 示例 - [Web Python 图像处理示例](https://elysiatools.com/zh/samples/web-image-processing-python): Web Python 图像处理示例，使用 PIL/Pillow 包括读取、保存、缩放和格式转换 - [无版权FLAC音频样本](https://elysiatools.com/zh/samples/flac-samples): 用于测试与开发的 FLAC 无损音频样本集合，包含自然声音与冥想音乐 - [无版权WAV音频样本](https://elysiatools.com/zh/samples/wav-samples): 用于测试与开发的未压缩 WAV 音频样本集合，包含自然声音与冥想音乐 - [Android Java 图像处理示例](https://elysiatools.com/zh/samples/android-image-processing-java): Android Java 图像处理示例，包括图像读取保存、缩放和格式转换 ## 相关内容 - [蛋白定量、酶动力学与序列分析工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/protein-quantification-enzyme-kinetics-sequence-tools): 在一个实验室工作流中完成蛋白测定、浓度换算、序列分析，以及酶活性、动力学、抑制和结合测量解读。 - [音频编码与格式转换工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/audio-convert): 在一个专题里比较音频格式转换、码率调整、采样率转换、编码切换和导出工具，适合交付与归档工作流。 - [图片格式转换与动画导出工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/image-convert): 在一个专题里比较 JPG、PNG、GIF、AVIF、WebP、TIFF、ICO、base64 以及动画导出相关的图片格式转换工具。 - [JSON 交换与格式翻译工具](https://elysiatools.com/zh/hubs/json-convert): 在一个专题里比较 JSON 与 CSV、YAML、TOML、GraphQL、XML、Markdown、Excel、BSON、EDN 等结构化格式之间的转换工具。