# 吸光度定量与酸碱计算

把仪器读数变成站得住的浓度——吸光度与透光率互转、解 Beer-Lambert 定律求缺失的那个变量、沿核酸链路从 A260 走到微克每毫升再到纳摩尔再到每微升拷贝数、由强酸强碱浓度预测 pH、用 Henderson-Hasselbalch 设计缓冲液、借摩尔电导率核验解离。

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- **关键词:** 吸光度转透光率, Beer Lambert 定律计算器, 摩尔消光系数, DNA 浓度 A260, DNA 拷贝数, 强酸强碱 pH 计算器, 缓冲液 Henderson-Hasselbalch, 摩尔电导率解离度

## 常见问题

### 仪器明明显示吸光度，为什么还要转透光率？

因为不是每台仪器都显示，而且这道校验是免费的——透光率是光度计物理上测到的东西，吸光度是它的对数，如果一台同时报告两者的仪器给出的两个值互相矛盾，它报告的是一次失准。亲手转一次，就是证明仪器自己的换算还诚实。

### A260 经验规则什么时候够用？

序列组成未知或不重要的日常场景——双链 DNA 每单位吸光度 50 微克每毫升的老约定，对上样决定和纯度检查足够接近。当数字要喂给摩尔反应——酶标定、转染——就走消光系数路线，因为碱基组成能把真实值拉动几十个百分点。

### 为什么缓冲液计算只信 pKa 上下一个单位？

因为缓冲能力在窗外崩塌——Henderson-Hasselbalch 很乐意从 pKa 4.5 算出 pH 9 的“结果”，但在那个比例下共轭对已经所剩无几，无力吸收外加的酸或碱。方程报出一个数；窗口才让这个数成其为缓冲。

### 电导率比 pH 多给了什么？

解离的独立证据。pH 报告氢离子；摩尔电导率报告溶质里到底有多少在导电——与极限电导之比给出解离度，进而给出解离常数。一个弱酸的 pH 和电导讲同一个故事，它才是你测过的弱酸，而不是你假设的弱酸。

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