# Калькулятор температуры отжига ПЦР (Ta = Tm − 5°C)

Вычисляет температуру отжига (Ta) ПЦР по двум правилам: простое лабораторное Ta = Tm − 5°C (берётся МЕНЬШИЙ Tm пары праймеров) и эмпирическая формула Рыхлика 1990: Ta = 0.3×Tm(праймера) + 0.7×Tm(продукта) − 14.9 (Tm продукта обычно 75–90°C; формула даёт на 1–8°C выше простого правила для типичных пар). Выводит рекомендуемую Ta, диапазон градиента ±3°C и направление подстройки: низкая Ta даёт неспецифичные полосы и димеры, высокая — нет продукта; держите разницу Tm праймеров в пределах 2–3°C и отжигайте по меньшему. Источники: Rychlik 1990, Innis & Gelfand 1990, Lorenz 2012. Только для планирования.

> Каноническая страница: https://elysiatools.com/ru/tools/annealing-temperature-calculator

- **Категория:** Education

- **Ключевые слова:** температура отжига, калькулятор ta пцр, tm минус 5, формула рыхлика, отжиг праймеров, оптимизация пцр, градиентная пцр, tm праймера, протокол пцр, дизайн праймеров, пцр, молекулярная биология

## Обзор

Калькулятор температуры отжига ПЦР рассчитывает рекомендуемую Ta по простому правилу Ta = меньший Tm праймеров − 5°C или по формуле Рыхлика 1990. Результат включает диапазон градиента ±3°C и помогает оценить направление подстройки температуры.

## Входные данные

- **Правило расчёта** (select): Simple rule uses the lower primer Tm; Rychlik also weighs the product Tm.
- **Tm прямого праймера (°C)** (number): Melting temperature of the forward primer.
- **Tm обратного праймера (°C)** (number): Melting temperature of the reverse primer.
- **Tm продукта (°C, Рыхлик)** (number): Amplicon melting temperature (typically 75–90°C for a 100–500 bp product); used by the Rychlik formula.
- **Знаков после запятой** (number)

## Когда использовать

- Чтобы быстро рассчитать начальную температуру отжига по значениям Tm прямого и обратного праймеров.
- Чтобы сравнить простое правило с формулой Рыхлика с учётом Tm продукта.
- Чтобы подготовить диапазон температур для градиентной ПЦР.

## Как это работает

- Введите Tm прямого и обратного праймеров, а также Tm продукта.
- Выберите простое правило или формулу Рыхлика 1990.
- Калькулятор берёт меньшее значение Tm пары для простого правила; формула Рыхлика учитывает Tm праймера и продукта.
- На выходе отображаются Ta, диапазон ±3°C и перекрёстная проверка по другому правилу.

## Сценарии использования

- Планирование первичной температуры отжига для новой пары праймеров.
- Подготовка градиентной ПЦР при неспецифичных полосах или отсутствии продукта.
- Сравнение лабораторного правила Ta = Tm − 5°C с формулой Рыхлика.

## Частые вопросы

### Как рассчитывается температура по простому правилу?

Из меньшего Tm пары праймеров вычитается 5°C: Ta = меньший Tm − 5°C.

### Что учитывает формула Рыхлика?

Она использует Tm праймера и Tm продукта: Ta = 0.3×Tm праймера + 0.7×Tm продукта − 14.9.

### Зачем нужен диапазон градиента?

Он задаёт интервал на 3°C ниже и выше рассчитанной Ta для планирования градиентной ПЦР.

### Какой Tm праймеров использовать при простом расчёте?

Используйте меньшее значение Tm из прямого и обратного праймеров.

### Что означает разница Tm праймеров более 2–3°C?

Такая разница может указывать на необходимость пересмотра пары праймеров; ориентироваться следует на меньший Tm.

## Связанные инструменты

- [Анализатор родословных аутосомно-доминантного наследования](https://elysiatools.com/ru/tools/autosomal-dominant-pedigree): Вычисляет риск для потомства при аутосомно-доминантном (АД) наследовании и оценивает соответствие наблюдаемых чисел ожидаемому расщеплению. Генотипы родителей → ожидаемая доля: AA × любой = все больны; Aa × Aa = 3:1 (75%); Aa × aa = 1:1 (50%); aa × aa = никто. Наблюдаемые числа проверяются критерием хи-квадрат (df = 1, критическое 3.841). Признаки АД родословной: вертикальная передача, оба пола поражены одинаково, есть передача отец→сын (исключает X-сцепленный доминантный тип), здоровые не передают (кроме de novo). Примеры: хорея Гентингтона, ахондроплазия, синдром Марфана. Источники: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls, OMIM. Только для обучения.
- [Калькулятор риска аутосомно-рецессивного наследования](https://elysiatools.com/ru/tools/autosomal-recessive-risk): Вычисляет вероятность рождения больного ребёнка (или хотя бы одного из n детей) с аутосомно-рецессивным заболеванием. Больной ребёнок (aa) должен получить рецессивный аллель от ОБОИХ родителей: P(ребёнок болен) = P(родитель 1 передаёт a) × P(родитель 2 передаёт a). Статусы: носитель (Aa), больной (aa), не носитель (AA), неизвестен (P(Aa)=c, P(aa)=c² по популяционной частоте). Два носителя → 25% на ребёнка, 50% носителей, P(носитель | здоров) = 2/3; хотя бы один из n = 1 − (1−r)^n. По умолчанию 0.04 (муковисцидоз 1/25). Источники: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls. Только для обучения, не заменяет медико-генетическое консультирование.
- [Калькулятор подсчёта клеток в камере Горяева](https://elysiatools.com/ru/tools/cell-counting-hemocytometer): Переводит сырой подсчёт из камеры Горяева (улучшенная Нойбауэра) в концентрацию: клеток/мл = (всего подсчитано ÷ число квадратов) × разведение × 10⁴ (большой квадрат 1 мм² при глубине 0,1 мм вмещает ровно 0,1 мкл). Введите общий подсчёт, число квадратов (обычно 4 угловых или 5 с центральным) и кратность разведения; при желании — объём образца для общего числа клеток. Даёт советы по идеальной плотности 20–100 клеток на квадрат. Источники: руководство Freshney, геометрия камеры. Только для обучения.
- [Калькулятор времени удвоения клеток](https://elysiatools.com/ru/tools/cell-doubling-time): Вычисляет кинетику экспоненциального роста по двум подсчётам: время удвоения t_d = ln2 × t ÷ ln(Nₜ/N₀), число удвоений n = ln(Nₜ/N₀) ÷ ln2 и удельная скорость μ = ln(Nₜ/N₀)/t (ч⁻¹). N₀ и Nₜ — число клеток или плотность в любых согласованных единицах; время — в часах/днях/минутах. Предполагается лог-фаза в обеих точках (посев субконфлюэнтный, сбор до контактного торможения), иначе t_d завышается; приведены ориентиры для HEK293/HeLa/CHO. Источник: руководство Freshney. Только для обучения.
- [Калькулятор жизнеспособности клеток (трипановый синий)](https://elysiatools.com/ru/tools/cell-viability-trypan-blue): Вычисляет жизнеспособность по подсчётам живых/мёртвых клеток в тесте исключения трипанового синего: жизнеспособность % = живые ÷ (живые + мёртвые) × 100; концентрация живых = подсчёт × разведение × 10⁴ ÷ квадраты. Краситель не проходит через целые мембраны: живые клетки светлые, повреждённые окрашиваются в синий. Даёт оценку состояния культуры (≥90% здорова, 70–90% приемлемо, <70% стресс) и советы протокола (считать в течение 3–5 мин; длительная экспозиция убивает живые клетки). Источники: Freshney, протокол Strober. Только для обучения.
- [Калькулятор КОЕ/мл (колониеобразующих единиц)](https://elysiatools.com/ru/tools/cfu-calculator): Переводит подсчёт колоний в концентрацию исходной культуры: КОЕ/мл = колоний × 10ⁿ ÷ объём посева (мл), где чашка засеяна из пробирки 10⁻ⁿ. Встроено правило счётного диапазона 30–300 колоний на чашку: >300 — TNTC (слишком много, увеличьте разведение), <30 — TFTC (слишком мало, уменьшите разведение), 0 колоний даёт предел обнаружения; при желании — общее КОЕ по объёму. Источники: Standard Methods, FDA BAM. Только для обучения.
- [Калькулятор числа копий ДНК (концентрация → копии)](https://elysiatools.com/ru/tools/dna-copy-number-calculator): Переводит массовую концентрацию ДНК в число молекул на микролитр: копий/мкл = c(г/мкл) × N_A ÷ (длина п.н. × 660 г/моль). Поддерживает нг/мкл (типичный выход NanoDrop, равен мкг/мл), пг/мкл (диапазон Qubit) и мкг/мкл; добавлен пересчёт в пмоль/мкл и общее число копий в заданном объёме. Ориентир: плазмида 5 000 п.н. при 50 нг/мкл → 9.12×10⁹ копий/мкл (0.0152 пмоль/мкл). Напоминания: 660 Да/п.н. — среднее, достаточное для плазмид/геномики/ампликонов (для точных олигов суммируйте массы оснований); A260 завышает при примеси РНК/свободных нуклеотидов — для точности используйте флуоресцентный метод. Источники: N_A СИ 2019, конвенция Thermo Fisher, Sambrook & Russell. Только для планирования.
- [Калькулятор единицы активности фермента (U, мкмоль/мин)](https://elysiatools.com/ru/tools/enzyme-activity-unit): Переводит сырые данные опыта в единицы активности фермента: 1 U = 1 мкмоль/мин (IUB 1978), 1 U = 16,67 нкат. Два входа: количество продукта (мкмоль) ÷ время (мин); или по Беру–Ламберту через ΔA/мин, ε (мМ⁻¹см⁻¹, напр. НАДН 6,22 при 340 нм), длину пути и объём: U = ΔA/мин × V(мл) ÷ (ε×l). Добавляет пересчёт в mU/нкат/мккат и подсказку о линейном окне поглощения (0,05–1,0 AU). Источники: комитет номенклатуры IUB, BIPM катал, Segel Biochemical Calculations. Только для обучения.

## Примеры

- [Примеры Обработки Изображений Web Python](https://elysiatools.com/ru/samples/web-image-processing-python): Примеры обработки изображений Web Python используя PIL/Pillow включая чтение, сохранение, изменение размера и преобразование формата
- [Примеры Обработки Изображений Android Java](https://elysiatools.com/ru/samples/android-image-processing-java): Примеры обработки изображений Android Java включая чтение/сохранение, масштабирование и преобразование формата
- [Примеры Обработки Изображений Android Kotlin](https://elysiatools.com/ru/samples/android-image-processing-kotlin): Примеры обработки изображений Android Kotlin включая чтение/сохранение, масштабирование и преобразование формата
- [Примеры Обработки Изображений Web Rust](https://elysiatools.com/ru/samples/web-image-processing-rust): Примеры обработки изображений Web Rust включая чтение/запись, масштабирование и преобразование форматов

## Связанные материалы

- [Инструменты кодирования и конвертации аудио](https://elysiatools.com/ru/hubs/audio-convert): Сравните инструменты конвертации аудиоформатов, изменения битрейта, частоты дискретизации, смены кодека и экспорта в одном хабе.
- [Инструменты конвертации форматов изображений и анимированного экспорта](https://elysiatools.com/ru/hubs/image-convert): Сравните конвертеры JPG, PNG, GIF, AVIF, WebP, TIFF, ICO, base64 и инструменты экспорта анимированных изображений в одном хабе.
- [Инструменты JSON-обмена и перевода форматов](https://elysiatools.com/ru/hubs/json-convert): Сравните инструменты преобразования JSON для CSV, YAML, TOML, GraphQL, XML, Markdown, Excel, BSON, EDN и других структурированных форматов в одном хабе.
- [Инструменты перевода цветовых пространств для веба и печати](https://elysiatools.com/ru/hubs/design-convert): Подборка инструментов для перевода цветовых пространств между вебом и печатью в одном хабе.