# Calculadora de comprimento de fragmentos de restrição

Estima os tamanhos dos fragmentos após a digestão: um substrato circular com n cortes produz n fragmentos (contornando a origem) e um linear produz n+1. O modo de posições calcula fragmentos exatos a partir de coordenadas separadas por vírgula; o modo de número de sítios dá a contagem e a média com distribuição uniforme. Inclui a frequência esperada de sítios em DNA aleatório: enzimas de 4 bases ~1 a cada 256 bp, de 6 bases ~1 a cada 4096 bp (REBASE/Sambrook) e avisos de resolução em agarose (<50 bp pode escapar). Fontes: Sambrook & Russell 3ª ed., REBASE. Apenas para educação.

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- **Categoria:** Education

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## Visão geral

A Calculadora de comprimento de fragmentos de restrição estima os tamanhos gerados por uma digestão de DNA circular ou linear. Informe as posições de corte para obter fragmentos exatos ou indique apenas o número de sítios para calcular a quantidade e o tamanho médio esperado.

## Entradas

- **Topologia do substrato** (select): Circular plasmids give n fragments from n cuts; linear DNA gives n+1.
- **Modo de entrada** (select): Enter exact cut positions, or just the number of cut sites for an average estimate.
- **Comprimento do substrato (bp)** (number): Total length of the substrate (plasmid or linear DNA) in base pairs.
- **Posições de corte (bp, separadas por vírgula)** (text): Cut coordinates counted from base 1 (positions mode); each must be strictly inside the substrate and unique.
- **Número de sítios de corte** (number): Number of cut sites (count mode); fragments = n circular or n+1 linear.
- **Casas decimais** (number)

## Quando usar

- Planejar uma digestão simples ou dupla de um plasmídeo circular.
- Estimar os fragmentos de um produto de PCR ou outro DNA linear.
- Comparar tamanhos esperados com a resolução de um gel de agarose.

## Como funciona

- Selecione a topologia do substrato: plasmídeo circular ou DNA linear.
- Informe o comprimento total em pares de bases e escolha o modo de entrada.
- No modo de posições, digite coordenadas de corte únicas e separadas por vírgulas para obter os fragmentos exatos.
- No modo de número de sítios, informe n cortes para calcular n fragmentos circulares ou n+1 fragmentos lineares, com uma estimativa média.

## Casos de uso

- Verificar rapidamente o mapa de uma dupla digestão de plasmídeo e confirmar se o total dos fragmentos corresponde ao tamanho do substrato.
- Prever os tamanhos produzidos ao cortar um amplicon linear em posições internas conhecidas.
- Fazer uma estimativa inicial quando se conhece o número de sítios, mas ainda não as coordenadas exatas.

## Perguntas frequentes

### Como são calculados os fragmentos de um plasmídeo circular?

Um substrato circular com n cortes produz n fragmentos, incluindo o segmento que contorna a origem.

### Quantos fragmentos resultam de um DNA linear?

Um DNA linear com n cortes internos produz n+1 fragmentos.

### As posições de corte são informadas em que formato?

Digite as coordenadas em bp, contadas a partir da base 1, separadas por vírgulas, como 1000, 2000.

### O que o modo de número de sítios informa?

Ele calcula a quantidade de fragmentos e o comprimento médio esperado considerando uma distribuição uniforme dos cortes.

### Um fragmento menor que 50 bp será visível no gel?

Pode não ser resolvido ou pode escapar em um gel de agarose; o resultado deve ser interpretado com essa limitação.

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