# Calculadora de Tm de oligonucleotídeos (correção por sal) Duas estimativas clássicas de Tm: a regra de Wallace Tm = 2×(A+T) + 4×(G+C) (oligos curtos <14 nt, sem dependência de sal) e a fórmula corrigida por sal Tm = 81.5 + 16.6×log₁₀[Na⁺] + 0.41×(%G+C) − 600/n (Sambrook 1989 p. 11.46, a mesma do Primer3; o termo de comprimento varia 500–675/n conforme a fonte). O modo automático escolhe pelo comprimento. Retorna %GC, composição e ambas as estimativas. São aproximações — para precisão de projeto use termodinâmica de vizinhos mais próximos (ferramenta pcr-primer-tm). Premissas: DNA, sem pareamentos incorretos, sem formamida/DMSO, [Na⁺] 0.01–1 M. Fontes: Wallace 1979, von Ahsen 2001, Sambrook & Maniatis, OligoCalc. Apenas para educação. > Página canônica: https://elysiatools.com/pt/tools/oligo-melting-temperature - **Categoria:** Education - **Palavras-chave:** calculadora tm oligo, temperatura fusão correção salina, regra wallace tm, tm 81.5 16.6 log sódio, conteúdo gc oligonucleotídeo, estimativa tm primer, temperatura hibridização, tm oligo curto, fórmula tm sambrook, biologia molecular, calculadora laboratório ## Visão geral A Calculadora de Tm de oligonucleotídeos estima a temperatura de fusão de sequências de DNA com a regra de Wallace e uma fórmula corrigida pela concentração de sódio. Ela também informa o comprimento, a composição de bases, o percentual de GC e as duas estimativas de Tm. ## Entradas - **Sequência do oligonucleotídeo (5'→3')** (text): DNA sequence, A/C/G/T only (spaces stripped, case-insensitive), 4–200 nt. - **Método de Tm** (select): Auto uses Wallace below 14 nt and the salt-corrected formula from 14 nt up. - **Concentração de sódio (mM)** (number): Total \[Na⁺\] (or equivalent monovalent) of the buffer; used by the salt-corrected formula. - **Casas decimais** (number) ## Quando usar - Estimar rapidamente a temperatura de fusão de um oligonucleotídeo de DNA. - Comparar a regra de Wallace com a fórmula de Tm corrigida por sal. - Verificar comprimento, composição de bases e percentual de GC antes de uma etapa experimental. ## Como funciona - Informe uma sequência de DNA de 4 a 200 nucleotídeos, usando apenas A, C, G e T, no sentido 5'→3'. - Escolha o método automático, a regra de Wallace ou a fórmula com correção por sal. - Informe a concentração total de sódio em mM; esse valor é usado pela fórmula corrigida por sal. - A ferramenta retorna a Tm selecionada, a outra estimativa, o percentual de GC e a composição da sequência. ## Casos de uso - Planejamento inicial de primers e sondas curtas de DNA. - Aulas e exercícios de biologia molecular sobre Tm, GC e força iônica. - Comparação rápida do efeito do comprimento e da concentração de sódio na hibridização. ## Perguntas frequentes ### Quais sequências posso inserir? Insira uma sequência de DNA com 4 a 200 nt, formada apenas por A, C, G e T. Espaços são removidos e maiúsculas e minúsculas são aceitas. ### Como o modo automático escolhe o método? Para sequências menores que 14 nt, usa a regra de Wallace. A partir de 14 nt, usa a fórmula corrigida por sal. ### Por que informar a concentração de sódio? A concentração de sódio é usada para calcular a estimativa de Tm corrigida por sal. A regra de Wallace não depende desse valor. ### A Tm calculada é exata? Não. São estimativas aproximadas para fins educacionais; elas não substituem cálculos termodinâmicos de vizinhos mais próximos. ### Que faixa de sódio é considerada? A ferramenta pressupõe uma concentração de Na⁺ entre 0,01 e 1 M, equivalente a 10 a 1.000 mM. ## Ferramentas relacionadas - [Calculadora de temperatura de anelamento PCR (Ta = Tm − 5°C)](https://elysiatools.com/pt/tools/annealing-temperature-calculator): Calcula a temperatura de anelamento (Ta) da PCR por duas regras: a regra simples de bancada Ta = Tm − 5°C (usando o MENOR Tm do par de primers) e a fórmula empírica de Rychlik 1990: Ta = 0.3×Tm(primer) + 0.7×Tm(produto) − 14.9 (o Tm do produto costuma ser 75–90°C e a fórmula fica 1–8°C acima da regra simples em pares típicos). Fornece a Ta recomendada, faixa de gradiente ±3°C e a direção de ajuste: Ta baixa dá bandas inespecíficas e dímeros, alta sem produto; mantenha os dois Tm dentro de 2–3°C e anele pelo menor. Fontes: Rychlik 1990, Innis & Gelfand 1990, Lorenz 2012. Apenas planejamento experimental. - [Analisador de pedigree de herança autossômica dominante](https://elysiatools.com/pt/tools/autosomal-dominant-pedigree): Calcula o risco na descendência para herança autossômica dominante (AD) e avalia o ajuste das contagens observadas à proporção esperada. Genótipos parentais → proporção esperada: AA × qualquer = todos afetados; Aa × Aa = 3:1 (75%); Aa × aa = 1:1 (50%); aa × aa = nenhum. Contagens observadas permitem um teste qui-quadrado (df = 1, crítico 3.841). Marcas do pedigree AD: transmissão vertical, ambos os sexos igualmente afetados, transmissão homem-para-homem presente (exclui dominante ligado ao X), não afetados não transmitem (exceto mutação de novo). Exemplos: Huntington, acondroplasia, Marfan. Fontes: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls, OMIM. Apenas uso educativo. - [Calculadora de risco de herança autossômica recessiva](https://elysiatools.com/pt/tools/autosomal-recessive-risk): Calcula a probabilidade de uma criança (ou pelo menos uma de n crianças) ser afetada por uma doença autossômica recessiva. Uma criança afetada (aa) deve receber um alelo recessivo de AMBOS os progenitores: P(criança afetada) = P(progenitor 1 transmite a) × P(progenitor 2 transmite a). Estados: portador (Aa), afetado (aa), não portador (AA), desconhecido (P(Aa)=c, P(aa)=c² pela frequência populacional). Dois portadores → 25% por filho, 50% portadores, P(portador | não afetado) = 2/3; pelo menos um de n = 1 − (1−r)^n. Padrão 0.04 (fibrose cística 1/25). Fontes: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls. Apenas uso educativo, não substitui aconselhamento genético. - [Calculadora de contagem celular em hemocitômetro](https://elysiatools.com/pt/tools/cell-counting-hemocytometer): Converte contagens brutas da câmara de Neubauer melhorada em concentração: células/mL = (total contadas ÷ quadrados) × diluição × 10⁴ (cada quadrado de 1 mm² com 0,1 mm de profundidade contém exatamente 0,1 µL). Informe o total contado, o número de quadrados (geralmente 4 cantos ou 5 com o central) e a diluição; opcionalmente o volume para o total de células. Inclui conselhos pela densidade ideal de 20–100 células por quadrado. Fontes: manual Freshney, geometria Neubauer. Apenas para educação. - [Calculadora de tempo de duplicação celular](https://elysiatools.com/pt/tools/cell-doubling-time): Calcula a cinética de crescimento exponencial a partir de duas contagens: tempo de duplicação t_d = ln2 × t ÷ ln(Nₜ/N₀), número de duplicações n = ln(Nₜ/N₀) ÷ ln2 e taxa específica μ = ln(Nₜ/N₀)/t (h⁻¹). N₀ e Nₜ podem ser números de células ou densidades em qualquer unidade consistente; o tempo aceita horas/dias/minutos. Pressupõe fase log em ambos os pontos (semeadura subconfluente, colheita antes da inibição por contato), senão t_d sai alto; inclui referências de HEK293/HeLa/CHO. Fonte: manual Freshney. Apenas para educação. - [Calculadora de viabilidade celular com azul de tripan](https://elysiatools.com/pt/tools/cell-viability-trypan-blue): Calcula a viabilidade a partir das contagens de células vivas/mortas no teste de exclusão do azul de tripan: viabilidade % = vivas ÷ (vivas + mortas) × 100; concentração de vivas = contagem × diluição × 10⁴ ÷ quadrados. O corante não atravessa membranas intactas: as vivas ficam brilhantes e as lesadas coram-se de azul intenso. Inclui leitura do estado da cultura (≥90% saudável, 70–90% aceitável, <70% estressada) e dicas de protocolo (contar em 3–5 min; exposição prolongada mata células viáveis). Fontes: Freshney, protocolo de Strober. Apenas para educação. - [Calculadora de UFC/mL (unidades formadoras de colônias)](https://elysiatools.com/pt/tools/cfu-calculator): Converte a contagem de colônias na concentração do cultivo original: UFC/mL = colônias × 10ⁿ ÷ volume plaqueado (mL), tendo a placa sido semeada a partir do tubo 10⁻ⁿ. Inclui a regra da faixa contável 30–300 colônias/placa: >300 sinaliza TNTC (numerosas demais, aumentar diluição), <30 sinaliza TFTC (pocas demais, diminuir diluição) e 0 colônias dá o limite de detecção; conversão opcional em UFC totais. Fontes: Standard Methods, FDA BAM. Apenas para educação. - [Calculadora de número de cópias de DNA (concentração → cópias)](https://elysiatools.com/pt/tools/dna-copy-number-calculator): Converte uma concentração mássica de DNA em cópias moleculares por microlitro: cópias/µL = c(g/µL) × N_A ÷ (comprimento pb × 660 g/mol). Aceita ng/µL (saída típica do NanoDrop, idêntico a µg/mL), pg/µL (faixa Qubit) e µg/µL; inclui conversão em pmol/µL e o total de cópias num volume opcional. Referência: um plasmídeo de 5.000 pb a 50 ng/µL → 9.12×10⁹ cópias/µL (0.0152 pmol/µL). Lembretes: 660 Da/pb é uma média suficiente para plasmídeos/genoma/amplicões (para oligos exatos some as massas das bases); o A260 superestima amostras com RNA/nucleotídeos livres — para precisão use ensaio fluorométrico. Fontes: N_A SI 2019, convenção Thermo Fisher, Sambrook & Russell. Apenas planejamento. ## Exemplos - [Exemplos de Processamento de Imagem Web Python](https://elysiatools.com/pt/samples/web-image-processing-python): Exemplos de processamento de imagem Web Python usando PIL/Pillow incluindo leitura, salvamento, redimensionamento e conversão de formato - [Exemplos de Processamento de Imagem Android Java](https://elysiatools.com/pt/samples/android-image-processing-java): Exemplos de processamento de imagem Android Java incluindo leitura/escrita, dimensionamento e conversão de formato - [Exemplos de Processamento de Imagem Android Kotlin](https://elysiatools.com/pt/samples/android-image-processing-kotlin): Exemplos de processamento de imagem Android Kotlin incluindo leitura/escrita, dimensionamento e conversão de formato - [Exemplos de Processamento de Imagem Web Rust](https://elysiatools.com/pt/samples/web-image-processing-rust): Exemplos de processamento de imagem Web Rust incluindo leitura/gravação, redimensionamento e conversão de formato ## Conteúdo relacionado - [Ferramentas de codificacao e conversao de audio](https://elysiatools.com/pt/hubs/audio-convert): Compare conversao de formatos de audio, ajustes de bitrate, conversao de taxa de amostragem, troca de codec e exportacao em um unico hub. - [Ferramentas de conversao de formatos de imagem e exportacao animada](https://elysiatools.com/pt/hubs/image-convert): Compare conversores de imagem para JPG, PNG, GIF, AVIF, WebP, TIFF, ICO, base64 e saidas voltadas para animacao em um unico hub. - [Ferramentas de intercambio JSON e traducao de formatos](https://elysiatools.com/pt/hubs/json-convert): Compare ferramentas de conversao JSON para CSV, YAML, TOML, GraphQL, XML, Markdown, Excel, BSON, EDN e outros formatos estruturados em um unico hub. - [Ferramentas de conversao de espacos de cor para web e impressao](https://elysiatools.com/pt/hubs/design-convert): Ferramentas reunidas para conversao de espacos de cor entre web e impressao em um unico hub.