# Calculadora de proporção molar de ligação (inserto:vetor) Configura ligações segundo NEB: pmol = ng × 10³ ÷ (650 × bp). O modo de cálculo de massa usa a fórmula clássica inserto_ng = proporção × vetor_ng × (bp_inserto ÷ bp_vetor) (o fator 650 cancela); o modo de verificação recebe ambas as massas e devolve a proporção molar real. Faixas recomendadas por tamanho do inserto: <200 bp 5–10:1, 200–999 bp 3–5:1, ≥1000 bp 1–5:1, avisando que proporções >10:1 favorecem concatenâmeros do inserto. Com o volume de reação, a ferramenta dá as concentrações nM (a ligase é sensível à concentração de extremidades, >1 nM é mais eficiente). Fontes: NEB NEBioCalculator e guia de ligação, Promega BioMath, Sambrook & Russell. Apenas para educação. > Página canônica: https://elysiatools.com/pt/tools/ligation-molar-ratio - **Categoria:** Education - **Palavras-chave:** proporção molar ligação, calculadora inserto vetor, calculadora ligação neb, preparo ligação dna, massa inserto ng ligação, molaridade vetor inserto, pmol dna ligação, proporção ligase t4, calculadora inserto clonagem, vetor desfosforilado ligação, biologia molecular, calculadora laboratório ## Visão geral Calcule a massa de inserto necessária para uma proporção molar inserto:vetor desejada ou verifique a proporção real a partir das massas de DNA. A ferramenta também estima pmol e, quando informado o volume da reação, as concentrações em nM, com faixas recomendadas por tamanho do inserto. ## Entradas - **Modo de cálculo** (select): Solve for the insert mass a desired ratio needs, or check the actual ratio of two masses. - **Tamanho do vetor (bp)** (number): Double-digested vector backbone length in base pairs. - **Massa do vetor (ng)** (number): Mass of the linearized vector in the reaction. - **Tamanho do inserto (bp)** (number): Insert fragment length in base pairs. - **Massa do inserto (ng)** (number): Insert mass (check mode); ignored in solve mode, which computes the required value. - **Proporção inserto:vetor desejada** (number): Molar insert:vector ratio (solve mode), e.g. 3 for a 3:1 setup. - **Volume da reação (µL, opcional)** (number): Total ligation volume in µL; enter 0 to skip nM concentrations. - **Casas decimais** (number) ## Quando usar - Ao preparar uma ligação de DNA com uma proporção molar específica entre inserto e vetor. - Ao conferir se as massas de um inserto e de um vetor linearizado atingem a proporção planejada. - Ao estimar as concentrações em nM da ligação a partir do volume total da reação. ## Como funciona - Escolha entre calcular a massa do inserto ou verificar a proporção real. - Informe o tamanho do vetor, a massa do vetor e o tamanho do inserto em bp. - No modo de cálculo, indique a proporção inserto:vetor desejada; no modo de verificação, informe também a massa do inserto. - Opcionalmente, informe o volume da reação para obter concentrações em nM e compare o resultado com a faixa recomendada para o tamanho do inserto. ## Casos de uso - Planejamento de ligações para clonagem molecular com diferentes tamanhos de inserto e vetor. - Conferência de massas de DNA antes de montar uma reação de ligação. - Avaliação de pmol, proporção molar e concentração em nM para fins educacionais e de planejamento experimental. ## Perguntas frequentes ### Qual fórmula é usada para calcular a massa do inserto? A ferramenta usa inserto_ng = proporção × vetor_ng × (bp do inserto ÷ bp do vetor). ### Quais proporções são recomendadas? Para inserto <200 bp, 5–10:1; de 200 a 999 bp, 3–5:1; e para inserto ≥1000 bp, 1–5:1. ### O que preciso informar no modo de verificação? Informe o tamanho e a massa do vetor, o tamanho e a massa do inserto. A ferramenta calcula a proporção molar real. ### Para que serve o volume da reação? Ele permite calcular as concentrações de vetor e inserto em nM. Informe 0 para não calcular essas concentrações. ### O que significa uma proporção acima de 10:1? Proporções acima de 10:1 podem favorecer a formação de concatenâmeros do inserto. ## Ferramentas relacionadas - [Conversor Absorbância↔Transmitância (A = −log₁₀T)](https://elysiatools.com/pt/tools/absorbance-transmittance-converter): Converte nos dois sentidos entre absorbância e transmitância: A = −log₁₀(T), T = 10⁻ᴬ, %T = 100·T e A = 2 − log₁₀(%T). Aceita absorbância A, transmitância percentual %T ou transmitância fracionária T e devolve as três representações de uma vez. Referências: A=0 → %T=100; A=1 → %T=10; A=0,301 → %T=50. Absorbância negativa implicaria %T > 100 %, impossível na espectrofotometria padrão, e é rejeitada. - [Calculadora de viabilidade celular com azul de tripan](https://elysiatools.com/pt/tools/cell-viability-trypan-blue): Calcula a viabilidade a partir das contagens de células vivas/mortas no teste de exclusão do azul de tripan: viabilidade % = vivas ÷ (vivas + mortas) × 100; concentração de vivas = contagem × diluição × 10⁴ ÷ quadrados. O corante não atravessa membranas intactas: as vivas ficam brilhantes e as lesadas coram-se de azul intenso. Inclui leitura do estado da cultura (≥90% saudável, 70–90% aceitável, <70% estressada) e dicas de protocolo (contar em 3–5 min; exposição prolongada mata células viáveis). Fontes: Freshney, protocolo de Strober. Apenas para educação. - [Calculadora de número de cópias de DNA (concentração → cópias)](https://elysiatools.com/pt/tools/dna-copy-number-calculator): Converte uma concentração mássica de DNA em cópias moleculares por microlitro: cópias/µL = c(g/µL) × N_A ÷ (comprimento pb × 660 g/mol). Aceita ng/µL (saída típica do NanoDrop, idêntico a µg/mL), pg/µL (faixa Qubit) e µg/µL; inclui conversão em pmol/µL e o total de cópias num volume opcional. Referência: um plasmídeo de 5.000 pb a 50 ng/µL → 9.12×10⁹ cópias/µL (0.0152 pmol/µL). Lembretes: 660 Da/pb é uma média suficiente para plasmídeos/genoma/amplicões (para oligos exatos some as massas das bases); o A260 superestima amostras com RNA/nucleotídeos livres — para precisão use ensaio fluorométrico. Fontes: N_A SI 2019, convenção Thermo Fisher, Sambrook & Russell. Apenas planejamento. - [Planejador de diluições em série (série 10×)](https://elysiatools.com/pt/tools/serial-dilution-planner): Planeja a clássica série de diluições de 10×: número de etapas n = ceil(log₁₀(estoque ÷ alvo)) a partir das concentrações, ou etapas definidas diretamente; inclui a tabela de concentrações por tubo (C_k = estoque ÷ 10^k) e a receita por tubo (mistura 1:9, p. ex. 100 µL do tubo anterior + 900 µL de diluente por tubo de 1 mL). Dicas: trocar ponteira a cada etapa, vortear 5–10 s, trabalhar do mais concentrado ao mais diluído. Combine com a calculadora de UFC/mL. Fontes: Standard Methods, apêndice FDA BAM. Apenas para educação. - [Calculadora de temperatura de anelamento PCR (Ta = Tm − 5°C)](https://elysiatools.com/pt/tools/annealing-temperature-calculator): Calcula a temperatura de anelamento (Ta) da PCR por duas regras: a regra simples de bancada Ta = Tm − 5°C (usando o MENOR Tm do par de primers) e a fórmula empírica de Rychlik 1990: Ta = 0.3×Tm(primer) + 0.7×Tm(produto) − 14.9 (o Tm do produto costuma ser 75–90°C e a fórmula fica 1–8°C acima da regra simples em pares típicos). Fornece a Ta recomendada, faixa de gradiente ±3°C e a direção de ajuste: Ta baixa dá bandas inespecíficas e dímeros, alta sem produto; mantenha os dois Tm dentro de 2–3°C e anele pelo menor. Fontes: Rychlik 1990, Innis & Gelfand 1990, Lorenz 2012. Apenas planejamento experimental. - [Analisador de pedigree de herança autossômica dominante](https://elysiatools.com/pt/tools/autosomal-dominant-pedigree): Calcula o risco na descendência para herança autossômica dominante (AD) e avalia o ajuste das contagens observadas à proporção esperada. Genótipos parentais → proporção esperada: AA × qualquer = todos afetados; Aa × Aa = 3:1 (75%); Aa × aa = 1:1 (50%); aa × aa = nenhum. Contagens observadas permitem um teste qui-quadrado (df = 1, crítico 3.841). Marcas do pedigree AD: transmissão vertical, ambos os sexos igualmente afetados, transmissão homem-para-homem presente (exclui dominante ligado ao X), não afetados não transmitem (exceto mutação de novo). Exemplos: Huntington, acondroplasia, Marfan. Fontes: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls, OMIM. Apenas uso educativo. - [Calculadora de risco de herança autossômica recessiva](https://elysiatools.com/pt/tools/autosomal-recessive-risk): Calcula a probabilidade de uma criança (ou pelo menos uma de n crianças) ser afetada por uma doença autossômica recessiva. Uma criança afetada (aa) deve receber um alelo recessivo de AMBOS os progenitores: P(criança afetada) = P(progenitor 1 transmite a) × P(progenitor 2 transmite a). Estados: portador (Aa), afetado (aa), não portador (AA), desconhecido (P(Aa)=c, P(aa)=c² pela frequência populacional). Dois portadores → 25% por filho, 50% portadores, P(portador | não afetado) = 2/3; pelo menos um de n = 1 − (1−r)^n. Padrão 0.04 (fibrose cística 1/25). Fontes: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls. Apenas uso educativo, não substitui aconselhamento genético. - [Calculadora de contagem celular em hemocitômetro](https://elysiatools.com/pt/tools/cell-counting-hemocytometer): Converte contagens brutas da câmara de Neubauer melhorada em concentração: células/mL = (total contadas ÷ quadrados) × diluição × 10⁴ (cada quadrado de 1 mm² com 0,1 mm de profundidade contém exatamente 0,1 µL). Informe o total contado, o número de quadrados (geralmente 4 cantos ou 5 com o central) e a diluição; opcionalmente o volume para o total de células. Inclui conselhos pela densidade ideal de 20–100 células por quadrado. Fontes: manual Freshney, geometria Neubauer. Apenas para educação. ## Exemplos - [Exemplos de Processamento de Imagem Web Python](https://elysiatools.com/pt/samples/web-image-processing-python): Exemplos de processamento de imagem Web Python usando PIL/Pillow incluindo leitura, salvamento, redimensionamento e conversão de formato - [Exemplos de Banco de Dados Vetorial](https://elysiatools.com/pt/samples/vector-database): Exemplos completos de banco de dados vetorial incluindo Chroma, Pinecone, Weaviate, FAISS e soluções vetoriais personalizadas - [Exemplos de Processamento de Imagem Android Java](https://elysiatools.com/pt/samples/android-image-processing-java): Exemplos de processamento de imagem Android Java incluindo leitura/escrita, dimensionamento e conversão de formato - [Exemplos de Processamento de Imagem Android Kotlin](https://elysiatools.com/pt/samples/android-image-processing-kotlin): Exemplos de processamento de imagem Android Kotlin incluindo leitura/escrita, dimensionamento e conversão de formato ## Conteúdo relacionado - [Ferramentas de codificacao e conversao de audio](https://elysiatools.com/pt/hubs/audio-convert): Compare conversao de formatos de audio, ajustes de bitrate, conversao de taxa de amostragem, troca de codec e exportacao em um unico hub. - [Ferramentas de conversao de formatos de imagem e exportacao animada](https://elysiatools.com/pt/hubs/image-convert): Compare conversores de imagem para JPG, PNG, GIF, AVIF, WebP, TIFF, ICO, base64 e saidas voltadas para animacao em um unico hub. - [Ferramentas de intercambio JSON e traducao de formatos](https://elysiatools.com/pt/hubs/json-convert): Compare ferramentas de conversao JSON para CSV, YAML, TOML, GraphQL, XML, Markdown, Excel, BSON, EDN e outros formatos estruturados em um unico hub. - [Ferramentas de conversao de espacos de cor para web e impressao](https://elysiatools.com/pt/hubs/design-convert): Ferramentas reunidas para conversao de espacos de cor entre web e impressao em um unico hub.