# Calculadora do ensaio de Bradford (curva-padrão de BSA) Quantifica proteína pelo método de Bradford (Coomassie G-250, 595 nm) com curva-padrão de BSA: cole as linhas «concentração(µg/mL), A595» dos padrões e as absorbâncias das amostras; a ferramenta ajusta por mínimos quadrados (inclinação, intercepto, R²), inverte c = (A−b)/m e multiplica pelo fator de diluição, retornando µg/mL e mg/mL. Leituras fora da faixa dos padrões são marcadas como extrapolação; abaixo do branco são rejeitadas como não quantificáveis. Pontos-chave: a resposta do corante varia muito com a proteína (BSA ≈ o dobro da IgG) e detergentes altos interferem; padrões e amostras no mesmo tampão. Fonte: Bradford 1976 Anal Biochem. Apenas para educação. > Página canônica: https://elysiatools.com/pt/tools/bradford-assay-calculator - **Categoria:** Education - **Palavras-chave:** calculadora ensaio bradford, quantificação proteína a595, ensaio coomassie, curva-padrão bsa, concentração proteína pela absorbância, regressão linear curva-padrão, protocolo bradford, concentração amostra desconhecida, ensaio proteína microplaca, calculadora bioquímica, calculadora laboratório ## Visão geral A Calculadora do ensaio de Bradford usa uma curva-padrão de BSA e leituras de absorbância A595 para estimar a concentração de proteína. Ela ajusta uma regressão linear, calcula a concentração das amostras, aplica o fator de diluição e apresenta os resultados em µg/mL e mg/mL. ## Entradas - **Padrões de proteína (µg/mL, A595)** (textarea): One standard per line: concentration in µg/mL, then A595 (comma, semicolon, tab, or space separated). - **Absorbâncias desconhecidas (A595)** (textarea): One sample A595 reading per line (blank-subtracted readings are fine as long as the curve includes the blank). - **Fator de diluição da amostra** (number): Dilution applied to the sample before the assay (1 = undiluted). - **Casas decimais** (number) ## Quando usar - Para quantificar proteínas a partir de leituras de absorbância a 595 nm. - Para calcular concentrações de amostras usando uma curva-padrão de BSA. - Para corrigir a concentração estimada pelo fator de diluição da amostra. ## Como funciona - Cole uma linha para cada padrão no formato concentração em µg/mL e A595, usando vírgula, ponto e vírgula, tabulação ou espaço como separador. - Insira uma absorbância A595 por linha no campo das amostras desconhecidas. - A ferramenta ajusta a curva por mínimos quadrados e informa inclinação, intercepto e R². - As concentrações são calculadas por c = (A − b)/m, multiplicadas pelo fator de diluição e exibidas em µg/mL e mg/mL. ## Casos de uso - Quantificação de proteínas em amostras de laboratório por ensaio de Bradford. - Conversão de leituras de microplaca em concentração de proteína usando BSA como padrão. - Revisão rápida de curvas-padrão, diluições e resultados de experimentos didáticos. ## Perguntas frequentes ### Quais dados devo inserir nos padrões? Insira uma linha por padrão com a concentração em µg/mL e a leitura A595, por exemplo: 10, 0.200. ### O que significa o fator de diluição? É a diluição aplicada antes do ensaio. Use 1 para uma amostra não diluída e 10 para uma diluição de dez vezes. ### Quais resultados a calculadora apresenta? Ela apresenta a concentração em µg/mL e mg/mL, além da inclinação, do intercepto e do R² da curva. ### O que acontece quando a absorbância está fora da faixa dos padrões? A leitura é marcada como extrapolação, pois está fora do intervalo usado na curva-padrão. ### A calculadora substitui um protocolo experimental? Não. É uma ferramenta educacional para os cálculos; padrões e amostras devem ser preparados e medidos adequadamente. ## Ferramentas relacionadas - [Calculadora do ensaio BCA (curva-padrão)](https://elysiatools.com/pt/tools/bca-assay-calculator): Quantifica proteína pelo método BCA (ácido bicinconínico, 562 nm) com curva-padrão: cole as linhas «concentração(µg/mL), A562» e as absorbâncias das amostras; a ferramenta ajusta por mínimos quadrados (inclinação, intercepto, R²), inverte c = (A−b)/m e aplica o fator de diluição (µg/mL e mg/mL). Leituras fora da faixa são marcadas como extrapolação; abaixo do branco, rejeitadas. Especificidades do BCA: tolera ~5% de detergente (melhor que Bradford para lisados); mas DTT/TCEP/β-mercaptoetanol (>1 mM) e EDTA alto reduzem/queleram o Cu²⁺ e inflacionam a leitura — remova-os antes; faixa útil ~20–2000 µg/mL (Micro BCA 0,5–20). Fonte: Smith 1985 Anal Biochem. Apenas para educação. - [Calculadora de concentração de DNA (absorbância A260)](https://elysiatools.com/pt/tools/dna-concentration-a260): Determina a concentração de DNA pela absorbância UV a 260 nm: concentração (µg/mL) = A260 × fator de diluição × constante ÷ trajeto óptico (cm). Constantes: DNA de fita dupla 1 OD = 50 µg/mL, fita simples 1 OD = 33 µg/mL (RNA 40 — veja a ferramenta de RNA). 1 µg/mL = 1 ng/µL; informe o volume de eluição para obter o rendimento total em µg. Inclui a janela linear 0.1–1.5: abaixo de 0.1 o ruído domina, acima de 1.5 o detector pode saturar. Pureza avalie por OD260/280. Fontes: Marmur & Doty 1961/1962, Sambrook & Russell, Thermo Fisher NanoDrop. Apenas para educação e planejamento experimental. - [Calculadora de pureza OD260/230 (contaminação por sais/solventes)](https://elysiatools.com/pt/tools/od260-230-ratio): Avalia a contaminação por sais e solventes orgânicos pela razão OD260/230 — o controle que enxerga o que o 260/280 não vê: ácido nucleico puro dá 2.0–2.2, e valores abaixo de 2.0 sinalizam arraste de guanidínio (TRIzol/kits de coluna), fenol, carboidratos, EDTA, sais altos ou β-mercaptoetanol; 2.2–2.3 costuma ser efeito aceitável do tampão; acima de 2.3 aponta artefato de água/tampão — remedir. Campo A280 opcional para o cruzamento OD260/280 (DNA ~1.8, RNA ~2.0): uma série de leituras cobre as duas dimensões de pureza. Com leituras < ~0.05 a razão não é confiável. Fontes: Thermo Fisher T042, Sambrook & Russell, Manchester 1995. Apenas educação. - [Calculadora de pureza de ácidos nucleicos (OD260/280)](https://elysiatools.com/pt/tools/od260-280-ratio): Avalia a pureza de ácidos nucleicos pela razão OD260/280: as bases absorvem no máximo a 260 nm e os aminoácidos aromáticos (e o fenol) perto de 280 nm, então A260/A280 diagnostica arraste de proteína/fenol. Valores esperados: DNA puro ≈ 1.8 (janela 1.7–2.0), RNA puro ≈ 2.0 (janela 1.8–2.2); DNA < 1.7 ou RNA < 1.8 indica contaminação por proteína/fenol/guanidina, DNA > 2.0 sugere contaminação com RNA, RNA > 2.2 aponta artefato de medição (baixa força iônica). Campo A230 opcional para a razão secundária A260/A230 (puro 2.0–2.2; abaixo disso guanidina/fenol/carboidratos/sais). Com leituras < ~0.05 a razão não é confiável. Fontes: Manchester 1995, Sambrook & Russell, Thermo Fisher T042. Apenas educação e planejamento. - [Calculadora de concentração de RNA (A260, 1 OD = 40 µg/mL)](https://elysiatools.com/pt/tools/rna-concentration-a260): Determina a concentração de RNA pela absorbância UV a 260 nm: concentração (µg/mL) = A260 × fator de diluição × 40 ÷ trajeto óptico (cm). A constante do RNA é 1 OD = 40 µg/mL, entre o DNA de fita dupla (50) e o de fita simples (33); um erro comum é manter a constante 50 do dsDNA, superestimando o RNA em 25%. 1 µg/mL = 1 ng/µL; informe o volume de eluição para o rendimento total. Inclui a janela linear 0.1–1.5; RNA puro deve dar OD260/280 ≈ 2.0 (DNA ~1.8) — avalie a pureza com a ferramenta de razão. Trabalhe sem RNase e no gelo. Fontes: Marmur & Doty, Sambrook & Russell, Manchester 1995, Thermo Fisher. Apenas para educação e planejamento. - [Comparação de gravidade de pneumonia (CURB-65 / PSI / SMART-COP)](https://elysiatools.com/pt/tools/curb-65-vs-pneumonia-severity): Calcula simultaneamente três escores de pneumonia e os compara: CURB-65 (0-5, encaminhamento), PSI/PORT (classe I-V, estratificação de mortalidade mais precisa), SMART-COP (0-10, prevê necessidade de suporte respiratório/vasopressor na UTI). Cada um tem foco: CURB-65 rápido; PSI mais preciso, porém complexo; SMART-COP detecta quem precisa de UTI. Mostra o total e a categoria de cada escore, e analisa a concordância (todos ambulatorial/internação/UTI). Em caso de discordância, conduta mais conservadora. Fontes: Lim 2003, Fine 1997, Charles 2008. Não é conselho médico. - [Seletor de Cor de Imagem](https://elysiatools.com/pt/tools/image-color-picker): Escolha cores de imagens especificando coordenadas. Obtenha valores de cor nos formatos HEX, RGB, HSL, HSV e CMYK. - [Tradutor de códons para aminoácidos](https://elysiatools.com/pt/tools/codon-amino-acid-translator): Traduz uma sequência de DNA ou mRNA em proteína usando o código genético padrão. Examina os 6 molduras de leitura (fita sentido e complementar reversa), marca códons de início (AUG) e de parada, identifica os ORFs mais longos e mostra a composição de aminoácidos com cores por classe química. Suporta normalização T→U e tradução da fita complementar reversa. ## Exemplos - [Exemplos de Processamento de Imagem Web Python](https://elysiatools.com/pt/samples/web-image-processing-python): Exemplos de processamento de imagem Web Python usando PIL/Pillow incluindo leitura, salvamento, redimensionamento e conversão de formato - [Amostras de Áudio FLAC Livres de Direitos Autorais](https://elysiatools.com/pt/samples/flac-samples): Coleção de áudio FLAC sem perdas para testes e desenvolvimento, incluindo sons da natureza e música de meditação - [Amostras de Áudio WAV Livres de Direitos Autorais](https://elysiatools.com/pt/samples/wav-samples): Coleção de áudio WAV sem compressão para testes e desenvolvimento, incluindo sons da natureza e música de meditação - [Exemplos de Processamento de Imagem Android Java](https://elysiatools.com/pt/samples/android-image-processing-java): Exemplos de processamento de imagem Android Java incluindo leitura/escrita, dimensionamento e conversão de formato ## Conteúdo relacionado - [Ferramentas de quantificação de proteínas, cinética enzimática e análise de sequências](https://elysiatools.com/pt/hubs/protein-quantification-enzyme-kinetics-sequence-tools): Planeje ensaios de proteínas, converta concentrações e analise sequências, atividade, cinética, inibição e ligação em um único fluxo de laboratório. - [Ferramentas de codificacao e conversao de audio](https://elysiatools.com/pt/hubs/audio-convert): Compare conversao de formatos de audio, ajustes de bitrate, conversao de taxa de amostragem, troca de codec e exportacao em um unico hub. - [Ferramentas de conversao de formatos de imagem e exportacao animada](https://elysiatools.com/pt/hubs/image-convert): Compare conversores de imagem para JPG, PNG, GIF, AVIF, WebP, TIFF, ICO, base64 e saidas voltadas para animacao em um unico hub. - [Ferramentas de intercambio JSON e traducao de formatos](https://elysiatools.com/pt/hubs/json-convert): Compare ferramentas de conversao JSON para CSV, YAML, TOML, GraphQL, XML, Markdown, Excel, BSON, EDN e outros formatos estruturados em um unico hub.