# Calculadora del coeficiente de extinción proteico (ε280)

Calcula ε280 según Pace 1995 / Gill & von Hippel 1989: ε280 = 5500×nTrp + 1490×nTyr + 125×ncistina (M⁻¹cm⁻¹, error típico ±5%). Las cistinas son pares de Cys unidos por puente disulfuro y solo cuentan en estado oxidado (⌊Cys/2⌋); la herramienta devuelve los valores totalmente reducido y totalmente oxidado para acotar el estado real. El modo secuencia cuenta W/Y/C y calcula el peso molecular con las masas medias de ProtParam; el modo recuento toma números de residuos y un peso opcional. Incluye A0.1% = ε/PM (absorbancia de 1 mg/mL), es decir c = A/ε para volver de la lectura al concentrado. Ojo: proteínas sin Trp/Tyr tienen ε280 casi nulo (use A205 o BCA) y corrija la contaminación de ácidos nucleicos (A260). Fuentes: Pace 1995, Gill & von Hippel 1989, ExPASy ProtParam. Solo para educación.

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- **Categoría:** Education

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## Descripción general

Calcula el coeficiente de extinción proteico ε280 a partir de una secuencia o del recuento de Trp, Tyr y Cys. La herramienta muestra los valores para cisteínas reducidas y oxidadas, el peso molecular en modo secuencia y A0.1% cuando se dispone del peso molecular.

## Entradas

- **Modo de entrada** (select): Count W/Y/C from a sequence, or enter residue counts directly.
- **Secuencia de proteína (códigos de una letra)** (textarea): One-letter codes, 20 standard residues (FASTA headers, whitespace, and '*' are stripped); sequence mode.
- **Número de triptófanos (Trp)** (number): Number of tryptophans (counts mode); each contributes 5500 M⁻¹cm⁻¹.
- **Número de tirosinas (Tyr)** (number): Number of tyrosines (counts mode); each contributes 1490 M⁻¹cm⁻¹.
- **Número de cisteínas (Cys)** (number): Number of cysteines (counts mode); each disulfide pair contributes 125 M⁻¹cm⁻¹ when oxidized.
- **Estado de las cisteínas** (select): Reduced cysteines contribute nothing; oxidized pairs (cystines) add 125 each.
- **Peso molecular (kDa, modo recuento)** (number): Protein molecular weight for the A0.1% conversion in counts mode; 0 skips it.
- **Decimales** (number)

## Cuándo usarlo

- Estimar ε280 antes de medir la concentración de una proteína por absorbancia a 280 nm.
- Comparar los valores de ε280 en estados totalmente reducido y totalmente oxidado.
- Convertir el coeficiente de extinción en A0.1% para una solución de 1 mg/mL.

## Cómo funciona

- Elige el modo de entrada: secuencia de proteína o recuento de residuos.
- En modo secuencia, introduce códigos de una letra; se cuentan automáticamente W, Y y C y se calcula el peso molecular.
- En modo recuento, introduce el número de Trp, Tyr y Cys y, opcionalmente, el peso molecular en kDa.
- La herramienta aplica ε280 = 5500×Trp + 1490×Tyr + 125×cistina y devuelve los valores reducido, oxidado y A0.1% cuando corresponde.

## Casos de uso

- Planificación de mediciones de concentración en proteínas purificadas.
- Estimación rápida de ε280 para péptidos y proteínas a partir de su secuencia.
- Evaluación del efecto de los puentes disulfuro sobre la absorbancia calculada.

## Preguntas frecuentes

### ¿Qué residuos contribuyen al ε280?

Trp aporta 5500, Tyr 1490 y cada cistina oxidada 125 M⁻¹cm⁻¹.

### ¿Cómo se cuentan las cisteínas oxidadas?

Se cuentan como pares: ⌊Cys/2⌋. Las cisteínas reducidas no aportan al cálculo.

### ¿Qué diferencia hay entre los modos secuencia y recuento?

El modo secuencia cuenta W, Y y C automáticamente; el modo recuento requiere introducir esos números.

### ¿Qué es A0.1%?

Es ε dividido por el peso molecular y representa la absorbancia de una solución de 1 mg/mL.

### ¿Es adecuado ε280 para cualquier proteína?

No. Las proteínas sin Trp ni Tyr tienen ε280 casi nulo; puede ser preferible A205 o BCA.

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