# Calculadora de proporción molar de ligadura (inserto:vector)

Configura ligaduras según NEB: pmol = ng × 10³ ÷ (650 × bp). El modo de cálculo de masa usa la fórmula clásica inserto_ng = proporción × vector_ng × (bp_inserto ÷ bp_vector) (el factor 650 se cancela); el modo de verificación entra ambas masas y devuelve la proporción molar real. Intervalos recomendados según el tamaño del inserto: <200 bp 5–10:1, 200–999 bp 3–5:1, ≥1000 bp 1–5:1, avisando de que proporciones >10:1 favorecen concámeros del inserto. Con el volumen de reacción se obtienen las concentraciones nM (la ligasa es sensible a la concentración de extremos, >1 nM es más eficiente). Fuentes: NEB NEBioCalculator y guía de ligadura, Promega BioMath, Sambrook & Russell. Solo para educación.

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- **Categoría:** Education

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## Descripción general

La calculadora de proporción molar de ligadura inserto:vector estima la masa de inserto necesaria para una proporción deseada o verifica la proporción real a partir de ambas masas. También calcula pmol y, si introduces el volumen de reacción, las concentraciones en nM.

## Entradas

- **Modo de cálculo** (select): Solve for the insert mass a desired ratio needs, or check the actual ratio of two masses.
- **Tamaño del vector (bp)** (number): Double-digested vector backbone length in base pairs.
- **Masa del vector (ng)** (number): Mass of the linearized vector in the reaction.
- **Tamaño del inserto (bp)** (number): Insert fragment length in base pairs.
- **Masa del inserto (ng)** (number): Insert mass (check mode); ignored in solve mode, which computes the required value.
- **Proporción inserto:vector deseada** (number): Molar insert:vector ratio (solve mode), e.g. 3 for a 3:1 setup.
- **Volumen de reacción (µL, opcional)** (number): Total ligation volume in µL; enter 0 to skip nM concentrations.
- **Decimales** (number)

## Cuándo usarlo

- Para calcular cuántos ng de inserto necesitas con una proporción molar inserto:vector concreta.
- Para comprobar si las masas de ADN preparadas alcanzan la proporción recomendada según el tamaño del inserto.
- Para estimar los pmol y las concentraciones nM de vector e inserto en un volumen de reacción.

## Cómo funciona

- Selecciona «Calcular masa del inserto» o «Verificar proporción real».
- Introduce el tamaño del vector y del inserto en pares de bases, además de las masas requeridas.
- En el modo de cálculo, indica la proporción inserto:vector deseada; en el modo de verificación, introduce también la masa real del inserto.
- Añade opcionalmente el volumen de reacción para obtener las concentraciones nM y consulta la banda recomendada.

## Casos de uso

- Planificar una ligadura de clonación ajustando la masa del inserto al tamaño y la masa del vector.
- Revisar una mezcla preparada antes de la reacción y detectar una proporción molar inferior a la recomendada.
- Comparar la cantidad de ADN y la concentración de extremos aproximada en distintos volúmenes de reacción.

## Preguntas frecuentes

### ¿Qué fórmula usa la calculadora para la masa del inserto?

Usa inserto_ng = proporción × vector_ng × (bp del inserto ÷ bp del vector).

### ¿Qué proporción molar se recomienda?

Para insertos menores de 200 bp, 5–10:1; de 200 a 999 bp, 3–5:1; y de 1000 bp o más, 1–5:1.

### ¿Qué ocurre si introduzco un volumen de reacción igual a 0?

La calculadora omite las concentraciones nM y muestra los demás resultados.

### ¿Qué resultados devuelve la calculadora?

Devuelve la masa calculada o la proporción real, los pmol de vector e inserto y, si se indica el volumen, sus concentraciones nM.

### ¿Una proporción superior a 10:1 es siempre mejor?

No. El exceso de inserto puede favorecer la formación de concatémeros del inserto.

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