# Calculadora de temperatura de anillado PCR (Ta = Tm − 5°C) Calcula la temperatura de anillado (Ta) de la PCR con dos reglas: la regla simple de banco Ta = Tm − 5°C (tomando el MENOR Tm del par de cebadores) y la fórmula empírica de Rychlik 1990: Ta = 0.3×Tm(cebador) + 0.7×Tm(producto) − 14.9 (el Tm del producto suele ser 75–90°C y la fórmula cae 1–8°C por encima de la regla simple en pares típicos). Entrega la Ta recomendada, un rango de gradiente ±3°C y la dirección de ajuste: Ta baja produce bandas inespecíficas y dímeros, Ta alta sin producto; mantenga los dos Tm dentro de 2–3°C y anille con el menor. Fuentes: Rychlik 1990, Innis & Gelfand 1990, Lorenz 2012. Solo planificación experimental. > Página canónica: https://elysiatools.com/es/tools/annealing-temperature-calculator - **Categoría:** Education - **Palabras clave:** temperatura de anillado, calculadora ta pcr, tm menos 5, fórmula rychlik, anillado de cebadores, optimización pcr, pcr gradiente, tm cebador, protocolo pcr, diseño cebadores, pcr, biología molecular ## Descripción general Calcula la temperatura de anillado (Ta) para una PCR a partir de los valores Tm de los cebadores y del producto. Elige la regla simple, Ta = Tm menor − 5 °C, o la fórmula empírica de Rychlik 1990; obtén también un rango de gradiente de ±3 °C para la planificación experimental. ## Entradas - **Regla de cálculo** (select): Simple rule uses the lower primer Tm; Rychlik also weighs the product Tm. - **Tm del cebador forward (°C)** (number): Melting temperature of the forward primer. - **Tm del cebador reverse (°C)** (number): Melting temperature of the reverse primer. - **Tm del producto (°C, Rychlik)** (number): Amplicon melting temperature (typically 75–90°C for a 100–500 bp product); used by the Rychlik formula. - **Decimales** (number) ## Cuándo usarlo - Cuando necesitas estimar la Ta inicial de un par de cebadores para una PCR. - Cuando quieres comparar la regla simple con la fórmula de Rychlik usando el Tm del producto. - Cuando vas a planificar una PCR de gradiente y necesitas un intervalo de temperaturas. ## Cómo funciona - Introduce los Tm del cebador forward y del cebador reverse. - Selecciona la regla simple o la fórmula de Rychlik 1990 e introduce el Tm del producto. - La regla simple usa el menor Tm de los cebadores y resta 5 °C; Rychlik calcula 0,3 × Tm del cebador + 0,7 × Tm del producto − 14,9. - La calculadora muestra la Ta recomendada, un rango de gradiente de ±3 °C y la orientación para ajustar la temperatura. ## Casos de uso - Planificación inicial de protocolos de PCR con un par de cebadores. - Comparación de una Ta basada en Tm con una estimación que incorpora el Tm del amplicón. - Diseño de un ensayo de PCR en gradiente para explorar la especificidad de la reacción. ## Preguntas frecuentes ### ¿Qué Tm se utiliza en la regla simple? Se utiliza el menor Tm del par de cebadores y se restan 5 °C. ### ¿Qué fórmula emplea Rychlik 1990? Ta = 0,3 × Tm del cebador + 0,7 × Tm del producto − 14,9. ### ¿Para qué sirve el Tm del producto? Se utiliza en la fórmula de Rychlik para calcular la temperatura de anillado. ### ¿Qué rango de gradiente calcula la herramienta? Calcula un intervalo que se extiende 3 °C por debajo y 3 °C por encima de la Ta recomendada. ### ¿Qué diferencia de Tm deberían tener los cebadores? Conviene mantener la diferencia entre ambos Tm dentro de aproximadamente 2–3 °C y anillar según el menor valor. ## Herramientas relacionadas - [Analizador de pedigrees de herencia autosómica dominante](https://elysiatools.com/es/tools/autosomal-dominant-pedigree): Calcula el riesgo en la descendencia para herencia autosómica dominante (AD) y evalúa el ajuste de los conteos observados a la proporción esperada. Genotipos parentales → proporción esperada: AA × cualquiera = todos afectados; Aa × Aa = 3:1 (75%); Aa × aa = 1:1 (50%); aa × aa = ninguno. Los conteos observados admiten una prueba chi-cuadrado (df = 1, crítico 3.841). Rasgos del pedigree AD: transmisión vertical, ambos sexos afectados por igual, existe transmisión hombre-a-hombre (excluye el dominante ligado al X), los no afectados no transmiten (salvo mutación de novo). Enfermedades ejemplo: Huntington, acondroplasia, Marfan. Fuentes: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls, OMIM. Solo uso educativo. - [Calculadora de riesgo de herencia autosómica recesiva](https://elysiatools.com/es/tools/autosomal-recessive-risk): Calcula la probabilidad de que un hijo (o al menos uno de n hijos) padezca una enfermedad autosómica recesiva. Un hijo afectado (aa) debe recibir un alelo recesivo de AMBOS progenitores: P(hijo afectado) = P(progenitor 1 transmite a) × P(progenitor 2 transmite a). Estados: portador (Aa), afectado (aa), no portador (AA), desconocido (P(Aa)=c, P(aa)=c² por frecuencia poblacional). Dos portadores → 25% por hijo, 50% portadores, P(portador | no afectado) = 2/3; al menos uno de n afectados = 1 − (1−r)^n. Portadores por defecto 0.04 (fibrosis quística 1/25). Fuentes: Griffiths, Hartl & Clark 2007, StatPearls. Solo uso educativo, no sustituye la consejería genética. - [Calculadora de recuento celular en cámara de Neubauer](https://elysiatools.com/es/tools/cell-counting-hemocytometer): Convierte recuentos brutos de la cámara de Neubauer mejorada en concentración: células/mL = (total contadas ÷ cuadrículos) × dilución × 10⁴ (cada cuadrículo de 1 mm² con profundidad de 0,1 mm contiene exactamente 0,1 µL). Introduzca el total contado, el número de cuadrículos (normalmente 4 esquinas o 5 con el central) y la dilución; opcionalmente el volumen para el total de células. Incluye consejos según la densidad ideal de 20–100 células por cuadrículo. Fuentes: manual de Freshney, geometría Neubauer mejorada. Solo para educación. - [Calculadora de tiempo de duplicación celular](https://elysiatools.com/es/tools/cell-doubling-time): Calcula la cinética de crecimiento exponencial a partir de dos recuentos: tiempo de duplicación t_d = ln2 × t ÷ ln(Nₜ/N₀), junto con el número de duplicaciones n = ln(Nₜ/N₀) ÷ ln2 y la tasa específica μ = ln(Nₜ/N₀)/t (h⁻¹). N₀ y Nₜ pueden ser números de células o densidades en cualquier unidad consistente; el tiempo acepta horas/días/minutos. Supone fase logarítmica en ambos puntos (siembra subconfluente, cosecha antes de la inhibición por contacto), de lo contrario t_d saldrá alto; incluye referencias de HEK293/HeLa/CHO. Fuente: manual Freshney. Solo para educación. - [Calculadora de viabilidad celular con azul de tripán](https://elysiatools.com/es/tools/cell-viability-trypan-blue): Calcula la viabilidad a partir de los recuentos de células vivas/muertas en el ensayo de exclusión del azul de tripán: viabilidad % = vivas ÷ (vivas + muertas) × 100; concentración de vivas = recuento × dilución × 10⁴ ÷ cuadrículos. El colorante no atraviesa membranas intactas: las vivas quedan brillantes y las dañadas se tiñen azul intenso. Incluye interpretación del estado del cultivo (≥90% sano, 70–90% aceptable, <70% estresado) y consejos de protocolo (contar en 3–5 min; la exposición prolongada mata células viables). Fuentes: Freshney, ensayo de Strober. Solo para educación. - [Calculadora de UFC/mL (unidades formadoras de colonias)](https://elysiatools.com/es/tools/cfu-calculator): Convierte el recuento de colonias en la concentración original: UFC/mL = colonias × 10ⁿ ÷ volumen sembrado (mL), donde la placa se sembró desde el tubo 10⁻ⁿ. Incluye la regla del rango contable 30–300 colonias/placa: >300 señala TNTC (demasiadas numerosas, subir dilución), <30 señala TFTC (demasiadas pocas, bajar dilución) y 0 colonias da el límite de detección; opcionalmente convierte a UFC totales por volumen. Fuentes: Standard Methods, FDA BAM. Solo para educación. - [Calculadora de número de copias de ADN (concentración → copias)](https://elysiatools.com/es/tools/dna-copy-number-calculator): Convierte la concentración másica de ADN en copias moleculares por microlitro: copias/µL = c(g/µL) × N_A ÷ (longitud pb × 660 g/mol). Admite ng/µL (salida típica de NanoDrop, idéntico a µg/mL), pg/µL (rango Qubit) y µg/µL; incluye la conversión a pmol/µL y el total de copias en un volumen opcional. Referencia: un plásmido de 5.000 pb a 50 ng/µL → 9.12×10⁹ copias/µL (0.0152 pmol/µL). Recordatorios: 660 Da/pb es un promedio suficiente para plásmidos/genoma/amplicones (para oligos exactos sume masa por base); el A260 sobreestima muestras con ARN/nucleótidos libres — para exactitud use ensayo con fluoróforo. Fuentes: constante de Avogadro SI 2019, convención Thermo Fisher, Sambrook & Russell. Solo planificación. - [Calculadora de unidad de actividad enzimática (U, µmol/min)](https://elysiatools.com/es/tools/enzyme-activity-unit): Convierte datos brutos de ensayo en unidades de actividad enzimática: 1 U = 1 µmol/min (IUB 1978), 1 U = 16,67 nkat. Dos entradas: producto formado (µmol) ÷ tiempo (min); o por Beer–Lambert con ΔA/min, ε (mM⁻¹cm⁻¹, p. ej. NADH 6,22 a 340 nm), trayecto óptico y volumen: U = ΔA/min × V(mL) ÷ (ε×l). Incluye conversión a mU/nkat/µkat y el aviso de la ventana lineal de absorbancia (0,05–1,0 AU). Fuentes: comité de nomenclatura IUB, BIPM katal, Segel Biochemical Calculations. Solo para educación y planificación. ## Ejemplos - [Ejemplos de Procesamiento de Imágenes Web Python](https://elysiatools.com/es/samples/web-image-processing-python): Ejemplos de procesamiento de imágenes Web Python usando PIL/Pillow incluyendo lectura, guardado, redimensionamiento y conversión de formato - [Ejemplos de Procesamiento de Imágenes Android Java](https://elysiatools.com/es/samples/android-image-processing-java): Ejemplos de procesamiento de imágenes Android Java incluyendo lectura/escritura, escalado y conversión de formato - [Ejemplos de Procesamiento de Imágenes Android Kotlin](https://elysiatools.com/es/samples/android-image-processing-kotlin): Ejemplos de procesamiento de imágenes Android Kotlin incluyendo lectura/escritura, escalado y conversión de formato - [Ejemplos de Procesamiento de Imágenes Web Rust](https://elysiatools.com/es/samples/web-image-processing-rust): Ejemplos de procesamiento de imágenes Web Rust incluyendo lectura/escritura, escalado y conversión de formato ## Contenido relacionado - [Herramientas de codificacion y conversion de audio](https://elysiatools.com/es/hubs/audio-convert): Compara conversion de formatos de audio, cambios de bitrate, conversion de frecuencia de muestreo, cambio de codec y exportacion en un solo hub. - [Herramientas de conversion de formatos de imagen y exportacion animada](https://elysiatools.com/es/hubs/image-convert): Compara convertidores de imagen para JPG, PNG, GIF, AVIF, WebP, TIFF, ICO, base64 y salidas pensadas para animacion en un solo hub. - [Herramientas de intercambio JSON y traduccion de formatos](https://elysiatools.com/es/hubs/json-convert): Compara herramientas de conversion JSON para CSV, YAML, TOML, GraphQL, XML, Markdown, Excel, BSON, EDN y otros formatos estructurados en un solo hub. - [Herramientas de conversion de espacios de color para web e impresion](https://elysiatools.com/es/hubs/design-convert): Herramientas reunidas para conversion de espacios de color entre web e impresion en un solo hub.