# Protein-Extinktionskoeffizienten-Rechner (ε280)

Berechnet ε280 nach Pace 1995 / Gill & von Hippel 1989: ε280 = 5500×nTrp + 1490×nTyr + 125×nCystin (M⁻¹cm⁻¹, typische Genauigkeit ±5%). Cystine sind disulfidverbrückte Cys-Paare und zählen nur im oxidierten Zustand (⌊Cys/2⌋); das Tool liefert den voll-reduzierten und den voll-oxidierten Wert, um den realen Zustand einzugrenzen. Der Sequenzmodus zählt W/Y/C und berechnet die Molekülmasse mit den ProtParam-Durchschnittsmassen; der Zählmodus nimmt Restanzahlen und eine optionale Masse. Enthält A0.1% = ε/MW (Absorption von 1 mg/mL), also c = A/ε für den Rückschluss auf die Konzentration. Achtung: Proteine ohne Trp/Tyr haben nahezu null ε280 (A205 oder BCA verwenden) und Nukleinsäurekontamination (A260) korrigieren. Quellen: Pace 1995, Gill & von Hippel 1989, ExPASy ProtParam. Nur für Ausbildung.

> Kanonische Seite: https://elysiatools.com/de/tools/protein-extinction-coefficient

- **Kategorie:** Education

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## Überblick

Der Protein-Extinktionskoeffizienten-Rechner bestimmt ε280 aus einer Proteinsequenz oder aus direkten Restanzahlen. Er zählt Tryptophan, Tyrosin und Cystein, gibt Werte für den reduzierten und oxidierten Zustand aus und berechnet bei vorhandener Molekülmasse zusätzlich A0.1% für eine 1-mg/mL-Lösung.

## Eingaben

- **Eingabemodus** (select): Count W/Y/C from a sequence, or enter residue counts directly.
- **Proteinsequenz (Einbuchstaben-Codes)** (textarea): One-letter codes, 20 standard residues (FASTA headers, whitespace, and '*' are stripped); sequence mode.
- **Anzahl Tryptophan (Trp)** (number): Number of tryptophans (counts mode); each contributes 5500 M⁻¹cm⁻¹.
- **Anzahl Tyrosin (Tyr)** (number): Number of tyrosines (counts mode); each contributes 1490 M⁻¹cm⁻¹.
- **Anzahl Cystein (Cys)** (number): Number of cysteines (counts mode); each disulfide pair contributes 125 M⁻¹cm⁻¹ when oxidized.
- **Cystein-Zustand** (select): Reduced cysteines contribute nothing; oxidized pairs (cystines) add 125 each.
- **Molekülmasse (kDa, Zählmodus)** (number): Protein molecular weight for the A0.1% conversion in counts mode; 0 skips it.
- **Dezimalstellen** (number)

## Wann verwenden

- Wenn Sie den theoretischen ε280-Wert eines Proteins aus seiner Sequenz abschätzen möchten.
- Wenn nur die Anzahl von Trp-, Tyr- und Cys-Resten sowie gegebenenfalls die Molekülmasse bekannt ist.
- Wenn Sie eine A280-Messung mit einem berechneten Extinktionskoeffizienten oder A0.1% einordnen möchten.

## Funktionsweise

- Wählen Sie den Sequenzmodus und geben Sie Einbuchstaben-Codes ein; FASTA-Kopfzeilen, Leerzeichen und '*' werden entfernt und W, Y und C gezählt.
- Alternativ wählen Sie den Zählmodus und tragen die Anzahlen für Tryptophan, Tyrosin und Cystein ein.
- Das Tool berechnet ε280 nach ε280 = 5500×nTrp + 1490×nTyr + 125×nCystin. Reduzierte Cysteine tragen nicht bei; im oxidierten Zustand zählt jedes Cysteinpaar als ein Cystin.
- Mit der Molekülmasse wird zusätzlich A0.1% = ε/MW bestimmt. Für eine Konzentrationsabschätzung gilt c = A280/ε.

## Anwendungsfälle

- Theoretische A280-Referenzwerte für rekombinante Proteine und Peptide vor einer Messung berechnen.
- Den Einfluss von Disulfidbindungen auf den erwarteten Extinktionskoeffizienten vergleichen.
- A280-Messwerte mit ε280 oder A0.1% in eine ungefähre Proteinkonzentration umrechnen.

## Häufig gestellte Fragen

### Welche Aminosäuren bestimmen ε280?

Berücksichtigt werden Tryptophan, Tyrosin und oxidierte Cysteinpaare, also Cystine.

### Wie werden Cysteine im oxidierten Zustand gezählt?

Je zwei Cysteine bilden ein Cystin und tragen 125 M⁻¹cm⁻¹ bei. Ein einzelnes übriges Cystein wird nicht gezählt.

### Was ist der Unterschied zwischen Sequenz- und Zählmodus?

Im Sequenzmodus werden W, Y und C automatisch aus der Proteinsequenz gezählt. Im Zählmodus geben Sie die Restanzahlen direkt ein.

### Was bedeutet A0.1%?

A0.1% ist die erwartete Absorption einer 1-mg/mL-Lösung und wird als ε/MW berechnet.

### Kann ε280 bei Proteinen ohne Trp und Tyr verwendet werden?

Solche Proteine haben nahezu kein ε280. Für die Konzentrationsbestimmung sind dann beispielsweise A205 oder ein BCA-Test geeigneter.

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